Question

我国科学家张道远先生通过从耐旱灌木白花柽柳中克隆得到TSOD基因，利用转基因技术转化到棉花中，获得了具备更强抗旱性的T4代转基因棉花株系。下图为转基因抗旱棉花的培育过程示意图，请据图回答：

(1)①过程表示用______扩增目的基因的方法。②过程用到的工具酶有______。步骤③一般用______处理农杆菌，使其易吸收周围环境中的DNA分子。
(2)将重组质粒导入棉花细胞除步骤④所示的方法外，还可采用______。如果受体细胞是动物的受精卵，则一般采用的方法是____。
(3)外植体培养成为试管苗的过程采用了______技术，利用了______的原理，步骤⑤⑥表示________。
(4)为了确定抗旱转基因棉花是否培育成功，可先用放射性同位素标记的______________作探针进行分子水平鉴定，再_______进行个体水平鉴定棉花植株的抗旱性。

Answer 1

（1）PCR技术  限制酶（限制性核酸内切酶）、DNA连接酶（2分）   Ca²⁺（或CaCl₂）
（2）花粉管通道法（基因枪法）  显微注射法
（3）植物组织培养   植物细胞的全能性  脱分化、再分化（2分）
（4）抗旱基因（TaMnSOD基因、目的基因）     移栽到干旱土地中

解析试题分析：(1)①过程表示用PCR技术扩增目的基因的方法。②过程用到的工具酶有限制酶（限制性核酸内切酶）、DNA连接酶。步骤③一般用Ca²⁺（或CaCl₂）处理农杆菌，使其易吸收周围环境中的DNA分子。
(2)将重组质粒导入棉花细胞除步骤④所示的方法外，还可采用花粉管通道法（基因枪法）。如果受体细胞是动物的受精卵，则一般采用的方法是显微注射法。
(3)外植体培养成为试管苗的过程采用了植物组织培养技术，利用了植物细胞的全能性的原理，步骤⑤⑥表示脱分化、再分化。
(4)为了确定抗旱转基因棉花是否培育成功，可先用放射性同位素标记的抗旱基因（TaMnSOD基因、目的基因）作探针进行分子水平鉴定，再移栽到干旱土地中进行个体水平鉴定棉花植株的抗旱性。
考点：本题考查基因工程和植物细胞工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构。