Question

2．研究人员用四倍体马铃薯（4n=48）和抗青枯病的野生型二倍体马铃薯（2n=24）进行体细胞杂交，培育抗青枯病的马铃薯．
（1）研究人员用四倍体马铃薯的叶片探究原生质体制备条件，结果如表所示：

组别	酶的种类	酶的浓度 （%）	原生质体产量 （×106个/g）	镜检结果
1	纤维素酶	1.0	0.4	未解离的细胞团多
	果胶酶	0.5
2	纤维素酶	1.0	0.08	有许多碎片
	果胶酶	1.0
3	纤维素酶	0.5	1.5	未完全解离
	果胶酶	0.5
4	纤维素酶	0.5	3.4	解离较好，细胞破碎严重
	果胶酶	1.0
5	纤维素酶	0.4	18.8	解离充分，碎片少
	果胶酶	0.7

①据表分析，制备原生质体的最佳组合是第5组，叶片解离程度主要取决于果胶酶的浓度．
②制备的原生质体应置于浓度略高于马铃薯叶片细胞液浓度的溶液中进行培养，以保持原生质体的正常形态．
（2）为了便于在显微镜下对杂种细胞进行镜检筛选，将用四倍体马铃薯叶片制备的原生质体与用野生型二倍体马铃薯的幼根（填“叶片”或“幼根”）为材料制备的原生质体进行融合．把两种原生质体置于加入PEG（或“聚乙二醇”）的溶液中促融．
（3）为进一步从染色体水平上检测杂种植株，科学家选取杂种植株根尖进行解离、漂洗后用碱性染料染色并制片，显微镜下对有丝分裂中期的细胞进行染色体计数．
（4）为达到育种目标，还需要对杂种植株进行青枯病抗性检测以筛选得到抗性马铃薯新种．

Answer 1

分析 1、分析图表：第1组和第2组、第3组和第4组的纤维素酶浓度相同，果胶酶浓度不同，实验结果原生质的产量不同，故叶片解离程度主要取决于果胶酶的浓度；
2、制备的原生质体应置于浓度等于细胞液浓度的溶液中进行培养，以保持原生质体的正常形态；
3、幼嫩的组织分生能力强，易组织培养成功．
4、用植株根尖制作有丝分裂装片的步骤为：解离→漂洗→染色→制片．

解答 解：（1）①据表分析，制备原生质体的最佳组合是第5组，根据第1组和第2组、第3组和第4组的纤维素酶浓度相同，果胶酶浓度不同，实验结果原生质的产量不同，可知：叶片解离程度主要取决于果胶酶的浓度．
②制备的原生质体应置于浓度或略高于马铃薯叶片细胞液浓度的溶液中进行培养，以保持原生质体的正常形态．
（2）可根据染色体的形态和数目对杂种细胞进行镜检筛选，将用四倍体马铃薯叶片制备的原生质体与用野生型二倍体马铃薯的幼根为材料制备的原生质体进行融合．（幼根有分裂增殖能力，能观察到染色体）把两种原生质体置于加入PEG（或“聚乙二醇”）的溶液中促融．
（3）为进一步从染色体水平上检测杂种植株，科学家选取杂种植株根尖进行解离、漂洗后用碱性染料染色并制片，显微镜下对有丝分裂中期的细胞进行染色体计数（因为中期细胞中染色体形态稳定、数目清晰，是观察染色体形态和数目的最佳时期）．
（4）为达到育种目标，还需要对杂种植株进行青枯病抗性检测以筛选得到抗性马铃薯新种．
故答案为：
（1）①5     果胶酶     ②略高于
（2）幼根      PEG（或“聚乙二醇”）
（3）解离、漂洗    有丝分裂中
（4）青枯病

点评 本题考查了根据图表获取有效信息，推测实验变量的能力、原生质体的制备、杂种细胞的鉴定方法、杂种植株的筛选等关知识，要求考生具有一定的审题和推理能力，难度中等．