Question

【题目】当将一段人类DNA胰岛素基因片段接合到细菌的DNA中时，细菌就会开始产生人的胰岛素。

（1）此工程属于_____________（动物/植物/微生物）基因工程。

（2）上述基因工程中，导入细菌的重组DNA分子的组成应该是_____________。

A.人类胰岛素基因+细菌基因

B.人类胰岛素基因+细菌基因+运载体

C.人类胰岛素基因+DNA连接酶

D.人类胰岛素基因+运载体

为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进一步降解， 分析片段大小。下列是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5 000bp （bp为碱基对）	第一步水解	产物（单位：bp）	第二步水解	产物（单位:bp）
	E酶切割	2100	第一步水解产物分离后，分别用F酶切割	1900 200
		1400		800 600
		1000		1000
		500		500
	F酶切割	2500	将第一步水解产物分离后分别用E酶切割	1900 600
		1300		800 500
		1200		1000 200
	经E酶和F 酶同时切割	1900 1000 800 600 500 200

（3）该实验设计主要体现了_____________原则。

（4）根据表中数据，下图中标出了相应限制性酶的酶切位点，正确的是_____________。

A.

B.

C.

D.

（5）据左图、右图可知，为高效利用F酶的酶切作用，反应温度最好控制在____________。

A. 50°C B. 60°C

C. 70°C D. 80°C

你的判断理由是________________________________________________。

Answer 1

【答案】微生物 D 对照（单一变量） C B 由左图可知，当温度为60°C70°C时，酶活性较高，而由右图可知70°C时保温30分钟，酶活性开始减弱，而60°C保温30分钟后 酶活性基本不发生变化，由此可知为高效利用F酶，反应温度最好应控制在60°C

【解析】

限制性核酸内切酶是可以识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶，简称限制酶。由表格分析可知E酶切割后有4段产物，说明酶E有3个切割位点；F酶切割后有3段产物，说明酶F有2个切割位点。

（1）该基因工程的受体细胞是细菌，故此工程属于微生物基因工程。

（2）上述基因工程中，目的基因是人类胰岛素基因，需要用运载体导入细菌，故导入细菌的重组DNA分子的组成应该是人类胰岛素基因+运载体，故选D。

（3）设计实验的基本原则要有对照实验。

（4）E酶切割后有4段产物，说明酶E有3个切割位点；F酶切割后有3段产物，说明酶F有2个切割位点。由表中酶切割后片段长度可知，1900+600=2500，800+500=1300，1000+200=1200，所以连接如C图所示，故选C。

（5）由左图可知，当温度为60°C70°C时，酶活性较高，而由右图可知70°C时保温30分钟，酶活性开始减弱，而60°C保温30分钟后 酶活性基本不发生变化，由此可知为高效利用F酶，反应温度最好应控制在60°C，故选B。