Question

12．科学工作者欲培育能产生含铁量较高的转基因花生新品种，具体步骤如图所示：
（1）培养基1中经过脱分化得
到愈伤组织，培养基2中筛选的方法是在培养基中加入一定量的潮霉素．在单克隆抗体制备的过程中也进行了筛选，其中第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞．
（2）若铁结合蛋白基因来自菜豆，利用菜豆细胞内的mRNA为模板，通过反转录形成cDNA，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体就叫做菜豆的cDNA文库．
（3）图中将目的基因导人受体细胞的方法为农杆菌转化法．要想检测导人的铁结合蛋白基因是否表达，在分子水平上可用抗原-抗体杂交法进行检测．
（4）图中用到的植物细胞工程技术是植物组织培养，其原理是植物细胞具有全能性．

Answer 1

分析 据图分析，重组Ti质粒中铁结合蛋白基因称为目的基因，潮霉素抗性基因为标记基因；将重组Ti质粒导入受体细胞的方法是农杆菌转化法；将开花后未成熟的胚进行植物组织培养，脱分化形成愈伤组织，作为受体细胞，最终培育形成转基因水稻，过程中需要生长素和细胞分裂素进行调节．
基因工程的一般操作步骤有：目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达．获取目的基因的方法有三种：①从基因文库中获取 ②利用PCR技术扩增 ③人工合成（化学合成）．

解答 解：（1）植物组织培养过程中，需要首先通过脱分化得到愈伤组织，培养基2中需要筛选出含有重组质粒的受体细胞，因此筛选的方法是在培养基中加入一定量的潮霉素（标记基因）．在单克隆抗体制备的过程中也进行了筛选，其中第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选是获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．
（2）若铁结合蛋白基因来自菜豆，利用菜豆细胞内的mRNA为模板，通过反转录形成cDNA，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体就叫做菜豆的cDNA文库．
（3）图中将目的基因导人受体细胞的方法为农杆菌转化法．要想检测导人的铁结合蛋白基因是否表达，在分子水平上可用抗原-抗体杂交法进行检测．
（4）图中用到的植物细胞工程技术是植物组织培养，其原理是植物细胞具有全能性．
故答案为：
（1）脱分化    潮霉素   获得杂交瘤细胞
（2）mRNA    载体   cDNA文库
（3）农杆菌转化法   抗原-抗体
（4）植物组织培养   全能性

点评 本题考查基因工程中培育转基因水稻的相关知识，意在考查学生理解的知识要点、获取信息以及识图分析能力和运用所学知识分析问题、解决问题的能力．