Question

【题目】科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图所示，请回答相关问题：

（1）过程①获得重组胚胎之前需要通过___________技术获得重组细胞，通过显微操作去除MⅡ期卵母细胞中的核，用微型吸管可一并吸出______________________。

（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其________________分离出ES细胞。步骤③中，需要构建含有干扰素基因的________________。构建之前可以利用PCR技术对目的基因进行扩增，PCR技术的原理是___________。

（3）将基因导入ES细胞常用的方法是_____________。体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的___________。

（4）为检测干扰素基因的转录情况，可采用___________方法，若有杂交带出现，表明目的基因已成功转录出mRNA。

Answer 1

【答案】 核移植 细胞核和第一极体 内细胞团 （基因）表达载体 DNA双链复制 显微注射 全能性 分子杂交技术

【解析】试题分析：分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程，其中①表示通过核移植技术获得重组胚胎的过程；②表示早期胚胎培养过程；③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞的过程。

（1）根据以上分析已知，①表示通过核移植技术获得重组胚胎的过程；核移植前要先用显微操作的方法去除卵母细胞的细胞核，并将第一极体也一并除去。

（2）ES细胞可以从囊胚的内细胞团中分离出来；步骤③将目的基因导入受体细胞时，需要先构建含有目的基因（干扰素基因）的表达载体；PCR技术可在体外大量扩增目的基因，其原理是DNA双链复制。

（3）将目的基因导入ES细胞（动物细胞）最有效的方法是显微注射法；体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的全能性。

（4）检测干扰素基因的转录情况，，可采用分子杂交技术，若有杂交带出现，表明目的基因已成功转录出mRNA。