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    15．基因工程操作步骤中，需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞，如图中①-③示一种筛选方法的过程．pBR322质粒含有两个抗性基因，分别是Ampr（氨苄青霉素）抗性基因和Tetr（四环素）抗性基因，其中在Tetr抗性基因上有下列目的基因的插入位点（插入将导致Tetr抗性基因功能性失活），请回答：

    （1）如图中①过程所需的酶除DNA连接酶以外，需要的限制酶是EcoRVSal1．
    （2）经过①过程，pBR322质粒可能出现的两种结果：A1是重组质粒 A2是没有发生重组的质粒．
    （3）经过导入过程，B（受体细菌）可能出现结果是ABCD（多选）
    A．导入未成功的细菌                   B．含A1的细菌
    C．含A2的细菌                        D．含A1和A2的细菌
    （4）②过程表示用含四环素（使细胞停止生长，但不致死）和环丝氨酸（使生长的细胞致死）的培养基中培养细菌甲，则培养结果C表示在培养基中可能存活的细菌包括导入不成功的细菌和导入了重组质粒的细菌．
    （5）若要进一步筛选出符合要求的受体细胞D，则③过程需要做的处理是（请参照过程②的方法）将存活的细菌转移到含氨苄青霉素的培养基上培养．

    分析 图中所示为基因工程四步骤：图3表示获取目的基因，图2图3表示构建基因表达载体，即①过程，将目的基因导入受体细胞A→B过程，目的基因的检测与鉴定②③过程．

    解答 解：（1）①过程为构建基因表达载体，需要对质粒进行切割和与目的基因相连接，所以要用限制酶和DNA连接酶；据图分析可知，限制酶可选EcoRV  Sal1．
    （2）①为构建基因表达载体，会出现将目的基因与质粒成功重组和重组失败的结果，所以ρBR322会出现两种结果，即：重组质粒和未重组的质粒；
    （3）经过导入过程，B（受体细菌）细菌有4类情况：含有不是重组的质粒、含有重组质粒的、不含有质粒的、同时含有重组和不重组的质粒．
    （4）细菌有三类：含有质粒（不是重组的）、含有重组质粒的、不含有质粒的．Tet抗性基因上有目的基因的插入位点，所以重组质粒上没有Tet抗性基因，成功导入重组质粒的细菌和没有导入的细菌均不含Tet抗性基因，即都不抗四环素，细胞可以在含四环素培养基上存活但不生长，而环丝氨酸会使生长的细胞致死，对不生长的细胞无影响，但会使含有抗四环素的细菌致死，所以C中成活的细菌有导入不成功的细菌和导入重组质粒的细菌．
    （5）经过C后，现需要含重组质粒的细菌，含重组质粒的细菌含有Amp抗性基因，可在氨卡青霉素培养基中生长，而导入不成功的细菌会在其中死亡，所以可将经过C存活的细菌转入含氨卡青霉素的培养基中培养．
    故答案为：
    （1）EcoR V  Sal 1
    （1）重组质粒    没有发生重组的质粒
    （3）A B C D
    （4）导入不成功的细菌和导入了重组质粒的细菌
    （5）将存活的细菌转移到含氨苄青霉素的培养基上培养

    点评 此题考查的内容较多，主要是针对基因工程的工具特点进行考查，考查学生的识记及理解能力；理解限制酶切下的末端有哪些，及各自末端的特点，这是学生容易犯错的地方需要注意；识记什么时候用限制酶和DNA连接酶，以及作为运载体需要哪些条件等，除此之外还考察了对于基因工程步骤考查，尤其是筛选含有重组质粒的受体细胞方法，这个考点是个难点，也需要学生很好的理解筛选的依据即需要理解运载体各特点．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    8．图1为中国水仙细胞结构及细胞内物质转运的示意图，图2为中国水仙根尖染色体核型分析照片，据图回答问题：

    （1）图1中双层膜包被的细胞器有④⑤ （填序号）．
    （2）细胞内丙酮酸脱氢酶的合成运输加工场所有①②③（填序号），最终被转运到④（填序号）发挥作用．
    （3）新转录产生的mRNA转运至细胞质需穿过⑥上的核孔，该结构对转运的物质具有选择性．
    （4）由图2染色体核型分析结果，得出推论：中国水仙只开花不结实的原因是中国水仙是三倍体，减数分裂时同源染色体联会紊乱，不能产生正常生殖细胞．为了进一步验证上述推论可以优先选用④ （填序号）作为实验材料进行显微观察．
    ①萼     ②花瓣       ③雌蕊      ④花药       ⑤花芽
    （5）将全部DNA分子双链均被32P标记的雄性动物某个细胞①置于不含32P的培养基中培养，经过连续两次细胞分裂后形成4个子细胞（过程如图3所示）．下列有关子细胞中染色体标记情况及细胞分裂方式的推断，正确的是D．
    A．若细胞②和③中的染色体均含有32P，则进行的一定是减数分裂
    B．若细胞②和③中的染色体均有一半含有32P，则进行的一定是有丝分裂
    C．若细胞进行的是有丝分裂，则细胞④、⑤、⑥、⑦中各有一半染色体含有32P
    D．若细胞进行的是减数分裂，则细胞④、⑤、⑥、⑦中全部染色体均含有32P．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    9．取燕麦幼苗若干，在胚芽鞘顶端以下插入云母片，如图1所示．

    （1）在图中1幼苗的左侧给予光照，结果幼苗向光弯曲（向左侧弯曲）．
    （2）由实验发现的生长素的基本特征是ACD（多选）．
    A．促进细胞伸长                    B．体内含量丰富
    C．单侧光照可引起分布不均          D．可长距离转运
    将燕麦幼苗在黑暗环境中横置于平台上，一段时间后实验结果如图2所示．（图中“+”的多少表示生长素的多少）
    （3）在黑暗条件下进行实验目的是避免（单侧）光照对植物（向性）生长的影响．
    （4）对该实验分析正确的是A．
    A．1、4处促进生长
    B．2、3处生长受到抑制
    C．实验说明植物体内生长素分布较多处生长快
    D．平台若置于水平转盘上缓慢转动，幼苗将水平生长
    为了探究重力和单侧光对生长素分布的影响程度，对刚萌发的盆栽燕麦进行如图3处理，A盒下侧有开口，可以进光．
    （5）结果预测及结论
    ①若若A、B中幼苗都向上弯曲生长，且B向上弯曲程度大，说明重力对生长素分布的影响大于单侧光．
    ②若A中幼苗向下弯曲生长，B中幼苗向上弯曲生长，说明单侧光对生长素分布的影响大于重力．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    6．如图是某二倍体生物体内某个细胞连续变化过程图．下列说法错误的是（　　）
    A．该二倍体生物是雌性动物
    B．丁图可能是卵细胞
    C．图示涉及两种分裂方式至少三次细胞分裂
    D．甲细胞中具有4个染色体组

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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年河北省唐山市高二上期中生物试卷（解析版） 题型：选择题

    下列有关肺炎双球菌转化实验和噬菌体侵染细菌实验的叙述，正确的是 （ ）

    ①都能证明DNA是主要的遗传物质

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    ③都利用了放射性同位素标记法

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    ⑥艾弗里提取的DNA掺杂有非常少量的蛋白质，实验中没有完全排除蛋白质的作用

    A．①④⑥ B．①②③④ C ④⑤⑥ D ④⑥

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    A．a+c-2acB．1+ac-bdC．b+d-2bdD．ad+bc

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

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    A．靶细胞在效应T细胞的作用下死亡可能与nuc-1基因被激活有关
    B．在胚胎发育过程中细胞中的nuc-1基因也在表达
    C．该基因编码的蛋白质需要经过内质网、高尔基体的加工并运输到细胞外
    D．癌变细胞中nuc-1基因的表达可能会受阻

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