回答下列关于微生物的问题.
营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变,致使细胞合成途径出现某些缺陷,丧失合成某些物质的能力,如氨基酸、维生素、碱基等的合成能力出现缺陷,必须在基本培养基(野生型菌株最低营养要求)中添加缺陷的营养物质(补充培养基)才能正常生长的一类突变株.基本培养基中加入一些营养物质,可以满足该微生物的各种营养缺陷型生长的培养基称为完全培养基.营养缺陷型在基础理论研究和生产应用中有广泛作用.青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成,可用于淘汰野生型菌株.筛选营养缺陷型菌株一般通过四个环节,即诱变、淘汰野生型、检出和鉴定营养缺陷型.
(1)取新活化枯草芽孢杆菌制备菌悬液,再用紫外线照射处理.下列关于将诱变后存活的个体培养,淘汰野生型菌株的做法和原理,正确的是
(多选)
A、培养在含有青霉素的基本培养基中,淘汰野生型菌株,保留缺陷型菌株
B、培养在含有青霉素的补充培养基中,淘汰野生型菌株,保留缺陷型菌株
C、完全培养基中青霉素可以杀死野生型菌株,缺陷型菌株得以生存
D、补充培养基中缺陷型菌株可以生存,野生型菌株不能生存
E、基本培养基中野生型可以生长繁殖,青霉素将其杀死
F、基本培养基中缺陷型不可以生长繁殖,青霉素不能将其杀死
(2)在培养皿倒上一层不含菌的基本培养基,待冷凝后加上一层含菌的基本培养基,其后再浇上一层不含菌的基本培养基.经培养后出现菌落,在皿底将菌落标记为A
1、A
2…,然后在其上再倒一薄层完全培养基,再培养,出现新的菌落,在皿底标记为B
1、B
2…,则A菌落与B菌落分别较可能是
、
(均选填野生型/突变型).
(3)将待测菌落处理后涂布于某培养基平板上培养,用灭菌牙签逐个挑取待测菌,先后点接于A培养基和B培养基平板上.前后位置及号码相对应.培养后观察.如图一.为检出营养缺陷型,A、B培养基应分别为
培养基、
培养基.菌落
为营养缺陷型.
(4)为鉴定上步检出的营养缺陷型是哪种营养缺陷型,将待测菌种悬液涂于图二含有基本培养基的培养皿中,培养皿背面划线标注C、D、E三区.C、D、E为三滤纸片,分别浸有氨基酸混合液、维生素混合液和碱基混合液.培养后观察.当观察到
现象,说明是该营养缺陷型.图二培养基也可称为
培养基.
(5)如检测菌为碱基类营养缺陷型,要进一步鉴定是哪种碱基营养缺陷型,可同图二方法加浸该营养物质的滤纸片,如加浸
的滤纸片.