Question

9．高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性．研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示．请回答下列问题：

（1）实验过程应采用无菌技术，防止培养物被微生物污染及操作者自身被微生物感染，操作者的双手需要进行清洁和消毒处理．
（2）Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是先调节pH，后灭菌．
（3）Ⅰ号培养基中的碳源为淀粉．若Ⅰ号培养基中的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高（或稀释不够）．
（4）部分嗜热菌的菌落周围形成透明圈，应挑出透明圈大（填“大”或“小”）的菌落接种到Ⅱ号培养基，该过程的目的是纯化目的菌；下次划线时接种环上的菌种来源于上次划线的末端．

Answer 1

分析 微生物筛选培养成功的关键是防止杂菌污染培养物和操作者，必须要做好相应的消毒或灭菌及严格的无菌操作．从混杂的微生物中筛选目的微生物的一般步骤是：样品取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．培养基制作完成后要调整pH，再灭菌，该筛选要使用以淀粉为唯一的碳源的选择培养基．

解答 解：（1）整个实验过程应采用无菌技术，防止培养物被微生物污染及操作者自身被微生物感染，实验前后操作者的双手需要进行清洁和消毒处理．
（2）培养基制作完成后要调整pH，再灭菌．
（3）Ⅰ号培养基属于选择培养基，该筛选要使用以淀粉为唯一的碳源的选择培养基．用稀释涂布平板法接种前需要对菌液进行梯度稀释，如果培养基中的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高（或稀释不够）．
（4）嗜热菌的菌落周围形成透明圈越大，说明嗜热菌产生高温淀粉酶的效率越高，应该就是筛选的目的微生物，将其菌落接种到Ⅱ号培养基，该过程的目的是纯化目的菌，接种时下次划线时接种环上的菌种来源于上次划线的末端．
故答案为：
（1）操作者自身    消毒
（2）先调节pH，后灭菌 
（3）淀粉   菌液浓度过高（或稀释不够）
（4）大      纯化      上次划线的末端

点评 本题主要考查微生物的筛选与分离，意在强化学生筛选分离的过程和微生物培养的无菌操作等知识．