Question

T-DNA可随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子(称为T₁代)。
(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除_____，因为后者产生的____会抑制侧芽的生长。
(2)为筛选出已转化的个体，需将T₁代播种在含_____的培养基上生长，成熟后自交，收获种子(称为T₂代)。
(3)为筛选出具有抗盐性状的的突变体，需将T₂代播种在含____的培养基上，获得所需个体。
(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与____植株进行杂交，再自交____代后统计性状分离比。
(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性____。
(6)根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取__________植株的DNA，用限制酶处理后，再用__________将获得的DNA片段连接成环(如下图)，以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_________作为引物进行扩增，得到的片段将用于获取该基因的全序列信息。

Answer 1

(1)顶芽     生长素
(2)(一定浓度的)除草剂
(3)(一定浓度的)盐
(4)野生型    1
(5)降低
(6)突变体    DNA连接酶     B、C