Question

1．三孢布拉氏霉茵β-胡萝卜素含量高、易于培养等特点而广泛应用于工业化β-胡萝卜素的生产．请回答下列问题：
（1）用稀释涂布平板法可以纯化三孢布拉氏霉茵，进行梯度稀释时一般是将1ml菌液移入盛有9ml无菌水的试管中．常用稀释涂布平板法法进行活菌计数，其原理是培养基表面的一个菌落来源于（稀释液中的）一个活菌．但统计的菌落数往往少于（填“多于”或“少于”）稀释液中的活菌数．
（2）不同的材料选用的提取方法不同，根据胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点，常用（有机溶剂）萃取法提取胡萝卜素，其效率主要取决于萃取剂的性质和用量．
（3）如图为提取的胡萝卜素样品通过纸层析进行鉴定的结果，从图中分析可知，色带Ⅰ为β-胡萝卜素．出现样品2的结果，可能原因是在操作过程中
①B（A．萃取温度高，时间长    B．干燥温度高，时间长）；
②A（A．未经浓缩蒸馏    B．点样太快，样点小）．

Answer 1

分析 据图分析：表示用纸层析法鉴定胡萝卜素的实验过程．胡萝卜素不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂，常用萃取法提取．据此分析作答．

解答 解：（1）进行梯度稀释时，需要将1mL菌液移入盛有9ml的无菌水中．稀释涂布平板法常用来进行微生物的计数，其原理是培养基表面的一个菌落来源于（稀释液中的）一个活菌．由于菌落可能是由两个或多个细胞形成，所以统计的菌落数往往少于稀释液中的活菌数．
（2）胡萝卜素不溶于水，易溶于无水乙醇等有机溶剂，所以常用萃取法提取胡萝卜素，萃取效率主要取决于萃取剂的性质和用量．
（3）据图分析，色素带Ⅰ与标准样色素带一致，故其为β胡萝卜素，出现样品2胡萝卜素含量减少的结果，可能原因是在操作过程中干燥温度高，时间长或未经浓缩蒸馏，导致色素被破坏．萃取温度高，会导致杂质增多；点样太快会出现样品1的现象．
故答案为：
（1）9　稀释涂布平板法   （稀释液中的）一个活菌   少于
（2）易溶于有机溶剂　（有机溶剂）萃取   萃取剂的性质和用量
（3）Ⅰ①B　②A

点评 本题主要考查无所谓的分离与胡萝卜素的相关知识，意在强化学生对胡萝卜素的提取与鉴定理解与运用．