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    在DNA重组技术中使用的工具酶是

    [　　]

    A．限制性核酸内切酶和DNA连接酶

    B．DNA水解酶和DNA连接酶

    C．限制性核酸内切酶和DNA聚合酶

    D．DNA聚合酶和DNA水解酶

    答案：A
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下图是对有机废弃物进行处理的一种方案，请回答问题：

    （1）施用有机肥料有利于提高农作物的产量，原因是土壤微生物分解有机肥料所产生的____________________使农作物的光合作用强度得到提高。

    （2）从资源化、无害化角度分析，途径②、③优于④的原因是_________________。

    （3）少量有机废弃物排入河流，不会使河流中的生物种类和数量发生明显变化．这说明生态系统具有______________________能力。

    （4）焚烧塑料垃圾所产生的二恶英会诱发____________________基因突变，导致正常细胞的生长和分裂失控而变成癌细胞。

    （5）能降解塑料的微生物属于生态系统的何种成分？_____________________。应在______________________的土壤中寻找能降解塑料的微生物，从含有多种微生物的土壤中分离出这类微生物，需使用________________培养基。若利用DNA重组技术将降解塑料的基因导入某些土壤微生物（如：根瘤菌）中，则土壤中的塑料有望得到较快降解，该技术的核心是构建基因表达载体，此过程使用到的酶有_________________________________。

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    科目：高中生物 来源：2012届山东省实验中学高三第四次诊断考试理科综合试卷（生物部分） 题型：综合题

    （现代生物科技）（8分）用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术，能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下：
    第一步：分离小鼠胚胎干细胞，这些细胞中含有需要改造的基因，称“靶基因”。
    第二步：获取与“靶基因”同源的DNA片断，利用特定技术在该DNA片段上插入neoR基因
    （新霉素抗性基因）成为突变DNA（如下图），使该片段上的靶基因失活。
    第三步：将插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因转移入胚胎干细胞，再通过同源互换，用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个，完成对胚胎干细胞的基因改造。
    第四步：将第三步处理后的胚胎于细胞，转移到特定培养基中筛选培养。
    其基本原理如下图所示：

    （1）第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是                     。neoR基因不仅能使靶基因失活，还是         ；“靶基因失活”的含义是           
    （2）从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠，运用到的生物技术有         、        、         等。
    （3）科学家可以通过‘“基因敲除”技术来治疗疾病，上题中获得的基因敲除小鼠，能否直接用来研究基因功能并说明原因                      ，                   
                           。     

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    科目：高中生物 来源：2011届广东省增城中学高三第一次综合测试理综）生物试题 题型：综合题

    下图是对有机废弃物进行处理的一种方案，请回答问题：

    （1）施用有机肥料有利于提高农作物的产量，原因是土壤微生物分解有机肥料所产生的____________________使农作物的光合作用强度得到提高。
    （2）从资源化、无害化角度分析，途径②、③优于④的原因是_________________。
    （3）少量有机废弃物排入河流，不会使河流中的生物种类和数量发生明显变化．这说明生态系统具有______________________能力。
    （4）焚烧塑料垃圾所产生的二恶英会诱发____________________基因突变，导致正常细胞的生长和分裂失控而变成癌细胞。
    （5）能降解塑料的微生物属于生态系统的何种成分？_____________________。应在______________________的土壤中寻找能降解塑料的微生物，从含有多种微生物的土壤中分离出这类微生物，需使用________________培养基。若利用DNA重组技术将降解塑料的基因导入某些土壤微生物（如：根瘤菌）中，则土壤中的塑料有望得到较快降解，该技术的核心是构建基因表达载体，此过程使用到的酶有_________________________________________。

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    科目：高中生物 来源：2010-2011学年广东省汕头市金山中学高二下学期期中考试生物试卷 题型：综合题

    （12分）质粒是DNA重组技术常用载体而得到广泛使用。请回答：
    （1）质粒的化学本质是                  。

    —A
    —TGCGC

     
    （2）质粒中的抗性基因在基因工程中被称为            ，其作用是              。

    （3）若质粒的切割末端为           ，则与之连接的目的基因切割末端应为      ；可使用        把质粒和目的基因连接在一起。
    （4）图1中A－D段表示质粒的某基因，阴影区的长度相当于mRNA的长度。B表示
    与RNA聚合酶结合位点。请在图上方的方框内用箭头表示出RNA聚合酶在C上的移
    动方向。为使目的基因直接表达，目的基因插入的最佳位点是图中的_________处。（填数字序号）

    （5）与一般质粒相比，农杆菌中的Ti质粒所具有的特点是                       。

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    科目：高中生物 来源：2012-2013年福建厦门大学附属科技中学高二下学期期中考试生物试卷（带解析） 题型：综合题

    融合蛋白是通过DNA重组技术将两个或多个基因的编码区首尾连接，由同一调控序列控制合成的蛋白质。人的表皮生长因子受体（EGFR）是影响癌症发生发展的重要因素，它在肺癌、脑肿瘤等实体瘤中均有大量表达。天花粉蛋白（TCS）是重要天花粉的有效成分，具有抗肿瘤作用。下图是通过基因工程方法将人表皮生长因子基因（EGF）和TCS基因连接起来，利用大肠杆菌生成人表皮生长因子—天花粉蛋白融合蛋白的过程示意图。请回答：

    （1）为了建立含有EGF的cDNA文库，应从健康人体的               细胞中提取总mRNA，通过  法合成cDNA。从cDNA文库中提取的EGF的长度比从基因组文库中提取的EGF短。利用         技术可以大量扩增EGF，该技术所利用的原理是                               。
    （2）在①过程中，应使用的限制酶是                       ，在融合蛋白基因的首端还应
    插入                   ，它是                          识别和结合的位点。
    （3）在②过程中，首先用_________________处理大肠杆菌，使其转变为_________________细胞。
    （4）应用___________________        _技术可检测大肠杆菌是否表达出融合蛋白。
    （5） 单纯使用天花粉蛋白治疗癌症疗效甚微，而人表皮生长因子——天花粉蛋白融合蛋白疗效显著，其原因是                                                              。
    （6）某同学为了筛选插入目的基因的表达载体，将处理过的载体分别置于含有氨苄青霉素和四环素的培养基上培养，观察其增殖和表达情况。此设计方案是否合理，            请说明理由                                                                          。

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