【题目】图 1 是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图,载体 质粒 P0 具有四环素 抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。请回答下列问题:
(1)EcoR V 酶切位点为,EcoR V 酶切出来的线性载体 P1 为__________未端。
(2)用 Taq DNA 聚合酶进行 PCR 扩增获得的目的基因片段,其两端各自带有一个腺 嘌呤脱氧核苷酸。载体 P1 用酶处理,在两端各添加了一个碱基为___________ 的 脱氧核苷酸,形成 P2;P2 和目的基因片段在__________酶作用下,形成重组质 粒 P3。
(3)为筛选出含有重组质粒 P3 的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到 A、B、C 三类菌落,其生长情况如下表(“+”代表生长,“﹣”代表不生长)。根据表 中结果判断,应选择的菌落是_____(填表中字母)类,另外两类菌落质粒导入情况分别是_____、___________________。
菌落类型 平板类型 | A | B | C |
无抗生素 | ﹢ | ﹢ | ﹢ |
氨苄青霉素 | ﹢ | ﹢ | ﹣ |
四环素 | ﹢ | ﹣ | ﹣ |
氨苄青霉素+四环素 | ﹢ | ﹣ | ﹣ |
(4)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒,拟设计引物进行 PCR 鉴定。图 2 所示为甲、乙、丙 3 条引物在正确重组质粒中的相应位置,PCR 鉴定时应选择的一对引物是____________。某学生尝试用图中另外一对引物从某一 菌落的质粒中扩增出了 400 bp 片段,原因是_______________。
【答案】平 胸腺嘧啶(T) DNA连接 B A类菌落含有PO C类菌落未转入质粒 乙丙 目的基因反向连接
【解析】
基因表达载体的基本结构包括复制原点、目的基因、标记基因、启动子、终止子等。根据题干信息和图形分析,P0是载体质粒,其含有的氨苄青霉素抗性基因(ampr)和四环素抗性基因(tetr)都属于标记基因,可以用检测目的基因是否导入受体细胞;EcoRV酶为限制酶,其切割质粒后悔破坏了四环素抗性基因(tetr)。
(1)根据题意分析,EcoRV 酶识别的序列是-GATATC-,并且两条链都在中间的T与A之间进行切割,因此其切出来的线性载体P1为平末端。
(2)据图分析,目的基因两侧为粘性末端,且漏出的碱基为A,则在载体P1的两端需要个加一个碱基T形成具有粘性末端的载体P2,再用DNA连接酶将P2与目的基因连接起来形成重组质粒P3
(3)根据以上分析已知,限制酶切割后破坏了四环素抗性基因,但是没有破坏氨苄青霉素抗性基因,因此含有重组质粒P3的菌落在四环素中应该不能生长,而在氨苄青霉素的培养基中能生长,结合表格分析可知,应该选择B类菌落。根据表格分析,A类菌落在氨苄青霉素和四环素的培养基中都能够生长,说明其导入的是P0; C类菌落在任何抗生素的培养基中都不能生长,说明其没有导入任何质粒。
(4)据图分析,根据目的基因插入的位置和PCR技术的原理分析,PCR 鉴定时应该选择的一对引物是乙和丙:根据题意和图形分析,某同学用图中的另外一对引物(甲、乙)从某一菌落的质粒中扩增出了400bp的片段,说明其目的基因发生了反向连接。
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【题目】下图为科研工作者利用小鼠制备H7N9禽流感病毒单克隆抗体的过程。请据图回答有关问题。
(1)诱导X细胞和Y细胞融合可采用化学试剂_________、辅助________________等物理方法、还可用__________________诱导其融合。
(2)在杂种细胞的培养过程中,为了防止污染,通常还要在细胞培养液中添加一定量的________,其培养液与植物组织培养的培养基相比,特有的天然成分________。
(3)单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选,首先用特定的选择性培养基筛选出_________,还需进行________________和专一抗体检测,最终获得足够数量的________________的细胞,选出符合要求的细胞后,可在体外条件下培养或注射到小鼠的腹腔内进行增殖。
(4)利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒,用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者,这种诊断运用了____________杂交技术,这体现了单克隆抗体______________的特性。
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【题目】治疗性克隆有望最终解决供体器官的短缺和器官移植出现的排斥反应。下图表示治疗性克隆的过程,下列有关叙述错误的是( )
A.上述过程利用了动物细胞核移植、动物细胞培养等技术
B.上述过程充分说明动物细胞具有全能性
C.由图可以看出胚胎干细胞可诱导成多种体细胞
D.①、②过程都发生DNA复制,转录和翻译
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【题目】百合以气孔白天关闭、夜间开放的特殊方式适应高温干旱环境。下面为百合叶肉细胞内的部分代谢示意图,据图分析正确的是( )
A.图中B物质可能是葡萄糖B.线粒体和细胞质基质均能产生CO2
C.PEP、RuBP均能与CO2结合D.夜间细胞液pH可能会下降
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【题目】抗体的结构如图所示,它由两条H链和两条L链组成。同一物种C区氨基酸序列恒定,不同抗体结合抗原的V区氨基酸序列有差异。
(1)在生物体内,抗体是由________细胞分泌的,该细胞可以来自____________增殖分化。
(2)传统方法获取抗体时,需要将相应的抗原反复注射到动物体内,从动物的血清中分离。显然,这种方法产生的抗体量和纯度等都很低特异性差,单克隆抗体的出现,克服了传统抗体的不足,单克隆抗体是指________________。
(3)天然的抗体左右两个V区结构完全相同,只能结合相同的抗原。通过一定技术手段可以得到双功能抗体(又叫双特异性抗体),它的两个V区能结合不同的抗原。制备双功能抗体的基本方法如下:将能分泌抗体1的杂交瘤细胞(A细胞)与能分泌抗体2的淋巴细胞(B细胞)进行融合,形成可分泌两种亲代抗体和杂种抗体的杂种—杂交瘤细胞(A—B)。细胞融合时需要用_______________、聚乙二醇或电激等诱导,融合后总共应该有______________种细胞(最多考虑两两融合)。
(4)双功能抗体在癌症治疗中可作为“生物导弹”:用其中一个V区识别癌细胞表面_________,用另一个V区将T细胞等杀伤细胞定向带到癌细胞所在的位置,这里,T细胞对癌细胞的攻击属于____免疫。
(5)细胞融合方法得到的双功能抗体,只是将两个不同抗体的V区集中到了一个抗体上,人们无法改变V区的结构。通过____技术,可以对双功能抗体的V区进行设计改造,使其更适合人类的需要。这种改造,最终还必须通过对DNA分子的改造来完成。
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【题目】下图a~d表示不同的生物或生态系统。下列有关说法正确的是
A. 若Y表示种群密度,则a~d四种野生生物的所处的营养级最低的一定是d种群
B. 若Y表示物种丰富度,a~d表示不同演替阶段,则自然演替的顺序为a→b→c→d
C. 若Y表示生物的能量,则生态系统a~d四个种群间一定有食物链d→c→b→a
D. 若Y表示物种多样性,a~d表示四个不同类型的生态系统中抵抗力稳定性最强的是d
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【题目】某研究性学习小组欲研究不同浓度的生长素类似物溶液对根和芽生长的影响,拟用小麦种子、温箱、培养皿、移液管、滤纸、尺、蒸馏水、10 mg/L 2,4-D(一种生长素类似物)以及0.1%升汞(表面消毒剂)等完成相关研究。
(1)该实验的原理是生长素类似物对植物生长有调节作用,其调节效应与______、_________等有关,用不同浓度的2,4-D处理萌发的种子,对根、芽的生长有不同的影响。
(2)请补充完整下面的方法步骤:
①取小麦种子,用0.1%升汞消毒适宜时间,再用蒸馏水冲洗若干次,置于22 ℃温箱中催芽2 天。
②取培养皿若干套,并编号。向1号培养皿中移入10 mg/L 2,4-D 溶液10 mL,然后移出1 mL到2号培养皿中,加9 mL蒸馏水并混匀,如此稀释至6号培养皿(浓度为0.0001 mg/L)。除之前的这6组培养皿外,还需另设一组,操作为___________________________________。
③在各培养皿中放置一滤纸圆片,选取萌发的种子10粒,合理排放于培养皿中,盖上皿盖,放在22 ℃温箱中黑暗培养3d。
④测量并记录___________。
(3)2,4-D的调节效应一般用一定时间内器官长度的增长百分率(%)来表示。计算增长百分率(%)需要获得的参数除了实验结束后的实验组长度以外,还应包括_____、_____。
(4)请将本实验最可能的结果用曲线图的形式表示出来___________(假设对根、芽的最适促进浓度分别是0.001 mg/L和0.1 mg/L)。
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【题目】如图表示科学家采用不同方法培育良种牛的过程。请据图回答:
(1)“转基因牛”D 培育过程中,常用受精卵作为外源基因的受体细胞,主要原因是_____。过程 h 常用的方法为_____。
(2)图中早期胚胎处于胚胎发育的_____期,其中①表示_____,③表示_____,胚胎干细胞来源于_____(填数字标号)。
(3)分割早期胚胎时应注意_____。图中 A、B 牛的性别_____(填“相同”“不相同”或“不一定相同”)。
(4)受体母牛必须和供体牛属于同一物种,移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是______。
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【题目】某二倍体植物的基因型为AaBbCC,这3对基因分别位于3对同源染色体上。下图表示以该植物为亲本进行的育种过程,下列叙述错误的是( )
A.单倍体幼苗的基因型有4种
B.个体Ⅰ的体细胞中含有2个染色体组
C.个体Ⅱ中重组类型占9/16
D.若要尽快获得基因型为aaBBCC的纯种,则应采用图中A→B→C过程进行育种
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