Question

15．人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得．流程如下：

（1）htPA基因与载体用限制性核酸内切酶切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体．筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的抗性基因．下列不属于有效筛选出含目的基因受体细胞的方法是A
A．检测受体细胞是否有质粒
B．检测受体细胞是否有目的基因
C．检测受体细胞是否有目的基因表达产物
D．检测受体细胞是否有目的基因转录出的mRNA
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射相应激素，使其超数排卵．采集的精子需要经过获能，才具备受精能力．
（3）为了获得更多的转htPA基因母羊，移植前首先对含有htPA基因的胚胎进行胚胎分割和培养．然后再通过胚胎移植技术可获得较多后代．
（4）下列关于羊胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是B
A．胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割
B．移植胚胎的遗传特性在孕育过程不受代孕羊影响
C．胚胎干细胞具有体积大、细胞核小、核仁明显等特点
D．经胚胎移植得到的哺乳动物是克隆动物．

Answer 1

分析 1、DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
2、目的基因分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
3、该基因工程需要对羊的性别进行选择，由于只有母羊能够分泌乳汁，因此选择母羊的胚胎进行移植．

解答 解：（1）htPA基因与载体需要用同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体．筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的抗性基因（标记基因）．
A、导入受体细胞的质粒可能是不含目的基因的重组质粒，A错误；
B、可通过检测受体细胞是否有目的基因来筛选出含目的基因受体细胞，B正确；
C、可通过检测受体细胞是否有目的基因表达产物来筛选出含目的基因受体细胞，C正确；
D、可通过检测受体细胞是否有目的基因转录出的mRNA来筛选出含目的基因受体细胞，D正确．
故选：A．
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵．采集的精子需要经过获能（处理），才具备受精能力．
（3）来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此为了获得更多的转htPA基因母羊，移植前首先对含有htPA基因的胚胎进行胚胎分割和培养，然后再通过胚胎移植技术可获得较多后代．
（4）A、胚胎分割时需将囊胚的内细胞团均等分割，A错误；
B、移植胚胎的遗传特性在孕育过程不受代孕羊影响，B正确；
C、胚胎干细胞具有体积小、细胞核大、核仁明显等特点，C错误；
D、经胚胎移植得到的哺乳动物不一定是克隆动物，也可能是试管动物或转基因动物，D错误．
故选：B．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶    抗性基因     A
（2）超数排卵    获能
（3）胚胎分割    胚胎移植
（4）B

点评 本题考查了基因工程和胚胎工程的相关知识，要求考生能够识记基因工程的操作步骤，明确该基因工程中需要选择母羊进行胚胎移植；识记胚胎工程的相关技术及应用，能结合所学的知识准确答题，属于考纲中识记、理解层次的考查．