Question

1．下列是利用植物生产抗艾滋病病毒的药物过程，请据图回答：

（1）获取目的基因的常用方法是基因文库中获取、人工合成和PCR技术扩增．若用PCR技术扩增抗旱基因，需要用到的酶是热稳定性DNA聚合酶．
（2）图中构成B的组件除抗旱基因、启动子、终止子外，还有标记基因，在构建此结构时A基因和Ti质粒结合的部位是T-DNA片段内．
（3）图中③目的基因导入烟草细胞的方法是农杆菌转化法，除此之外导入植物受体细胞的方法还可以是花粉管通道法和基因枪法．
（4）含有目的基因的受体细胞培养成烟草植株的培养基中，除加入一定的营养成分外，还需要添加植物激素，同时除提供适宜的温度、光照和氧气等环境条件外，成功的关键是无菌操作．
（5）与该培养过程所用培养基相比，用于动物细胞培养的培养液除含有水分，无机盐、糖类、维生素以及氨基酸之外，还需要添加血清、血浆．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具有：限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体．需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端，再通过DNA连接酶连接目的基因和运载体．将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法．基因表达载体的组成包括：目的基因、启动子、终止子、标记基因等．标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．例：用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性．
2、图示过程为基因工程流程，①是构建基因表达载体，②将目的基因导入受体细胞，③目的基因导入烟草细胞，然后经过植物组织培养获得完整植株个体．

解答 解：（1）获取目的基因的常用方法有基因文库中获取、人工合成和PCR技术扩增等，其中PCR技术需要用热稳定性DNA聚合酶．
（2）图中B为重组质粒，其结构包括抗旱基因（目的基因）、启动子、终止子外、标记基因，在构建此结构时A基因和Ti质粒结合的部位是T-DNA片段内．
（3）图中③目的基因导入烟草细胞的方法是农杆菌转化法，还可以用花粉管通道法和基因枪法．
（4）决定脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类及比例，因此在培养过程中，除添加必要的营养物质，还需要向培养基中添加植物激素；植物组织培养时除提供适宜的温度、光照和氧气等环境条件外，成功的另一关键是无菌操作．
（5）动物细胞培养的培养液成分：水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸等之外，还要加入动物血清．
故答案为：
（1）基因文库中获取   人工合成   热稳定性DNA聚合酶
（2）标记基因   T-DNA片段内
（3）农杆菌转化法  花粉管通道法和基因枪法
（4）植物激素    无菌操作
（5）血清、血浆

点评 本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或的能力．要注意，基因表达载体的构建是在生物体外完成的．PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术．通过这一技术，可以获取大量的目的基因．农杆菌能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有感染能力．