Question

【题目】白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母菌细胞中，使其分泌出有活性的白细胞介素。

（1）为增加白细胞介素基因的数量，可使用___________________技术，但前提是必须知道该基因的部分核苷酸序列，以便根据这一序列_________________。

（2）为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因，携带外源基因的质粒上应有___________，还应有____________________，以利于外源基因的表达。

（3）白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为_________。在表达过程中，启动子需与____________________识别和结合，从而驱动转录过程。

（4）为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而使用酵母菌细胞作为受体细胞，可能原因是__________________________________。

Answer 1

【答案】PCR 设计引物 标记基因 启动子和终止子 转化 RNA聚合酶 细菌细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器

【解析】

分析题图：图示表示基因表达载体的构建过程，载体和目的基因都有限制酶EcoRⅠ与EcoR52的切割位点，所以切割载体和目的基因时用限制酶EcoRⅠ与EcoR52，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体。基因表达载体含有目的基因、启动子、终止子、标记基因等成分。

（1）基因工程中，扩增目的基因的方法为PCR技术，但前提是必须知道基因的已知序列，以便设计引物。

（2）基因表达载体含有目的基因、启动子、终止子、标记基因等成分，标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。因此启动子和终止子可利于外源基因的表达。

（3）在重组载体导入酵母菌细胞之前，需用钙离子处理酵母菌，使酵母菌称为感受态细胞，白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。在表达过程中，启动子需与RNA聚合酶识别和结合，从而驱动转录过程。

（4）在体液免疫过程中，白细胞介素是由T淋巴细胞分泌的。由于细菌属于原核生物，细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器，因此为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而使用酵母细胞作为受体细胞。