【题目】大肠杆菌的质粒上含有LacZ基因，其编码的产物β半乳糖苷酶在x-gal和IPTG同时存在时，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。下图为利用该质粒进行的转基因过程，回答下列问题：
(1)在基因工程中，大肠杆菌质粒通常作为___________,除此以外，基因工程操作还需要___________和___________两种工具。
(2)基因工程的核心操作步骤是______________________。
(3)本题中将目的基因导入受体细胞的方法是___________，目的基因在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为___________。
(4)加入了X-gal和IPTG培养基被称为___________培养基，能够筛选出含目的基因的菌落是___________(填“①”“②”或“③”)，颜色是___________。
【答案】运载体（或载体） 限制性内切酶 DNA连接酶 基因表达载体的构建 感受态法 转化 选择 ③ 白色
【解析】
分析题图：目的基因的左侧有限制酶EcoRI的识别序列，右侧是限制酶SmaI的识别序列，而质粒上只有限制酶EcoRI的识别序列，所以需要用限制酶EcoRI来切割质粒，用限制酶EcoRI和SmaI来切割含有目的基因的外源DNA分子，这样就使目的基因右侧无法与质粒连接，所以目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接限制酶EcoRI切割形成的末端，即-TTAA。用限制酶EcoRI切割质粒时，会破坏质粒上的lacZ'基因，但切割后的质粒自身环化后，lacZ'基因又被修复，能表达产生β-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG 存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，所以菌落①②呈现蓝色；菌落③导入的是重组质粒，其lacZ'基因被破坏，不能表达产生β-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG 存在下，菌落颜色为白色。
(1)在基因工程中，大肠杆菌质粒通常作为运载体（或载体），基因工程操作需要两种工具酶限制性内切酶和DNA连接酶。
(2) 基因工程的四个步骤：获取目的基因；目的基因与运载体结合；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与表达。基因工程的核心操作步骤是基因表达载体的构建。
(3)感受态法是用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于易于吸收周围环境中的DNA分子的感受态，有利于目的基因导入受体细胞。目的基因在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。
(4)加入了X-gal和IPTG培养基被称为选择培养基，用限制酶EcoRI切割质粒时，会破坏质粒上的lacZ'基因，但切割后的质粒自身环化后，lacZ'基因又被修复，能表达产生β-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG 存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，所以菌落①②呈现蓝色；菌落③导入的是重组质粒，其lacZ'基因被破坏，不能表达产生β-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG 存在下，菌落颜色为白色。
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【题目】科学家们发现长年生活在寒带的比目鱼不怕冻，因为比目鱼的身体里有一种抗冻蛋白质（AFP）。科学家将比目鱼的抗冻蛋白质基因转移到西红柿里，培育出了抗冻西红柿，这种西红柿可以在冬季或较寒冷的地区种植，使得人们一年到头都能吃到西红柿。下图为抗冻番茄的培育过程。据图回答：
（1）①过程为___________________，重组质粒除了含有目的基因外，还必须有_________________________________________________________________、复制原点。
（2）②过程常采用农杆菌转化法将AFP基因导入番茄细胞，除此之外，还可利用______________法（答出一种即可），③过程应用的主要技术是____________________________。
（3）若AFP基因已表达出抗冻蛋白，还需要进行个体水平的检测，如通过______________，以确定抗冻番茄植株是否具有抗寒特性。
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【题目】下图表示利用大肠杆菌探究DNA复制方式的实验，下列叙述正确的是
A. 可用噬菌体代替大肠杆菌进行上述实验
B. 可用(NH4)235SO4、(NH4)232SO4分别代替15NH4Cl、14NH4Cl进行上述实验
C. 试管③中b带的DNA的两条链均含有14N
D. 仅比较试管②和③的结果不能证明DNA复制为半保留复制
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【题目】番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如图，请回答：
(1)该过程需要的工具酶有限制性核酸内切酶和_______________________。
(2)在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的常用方法是_______。
(3)从图中可见，mRNA1和mRNA2通过碱基互补配对形成________(填：单/双)链RNA直接导致了__________无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。
(4)普通番茄细胞导入目的基因后，先要接种到诱导培养基上培养，脱分化后得到__________，然后再转接到培养基上，诱导出试管苗，然后进一步培养成正常植株。这种培养方法叫做________________,其依据的原理是___________________。
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【题目】下列有关胰岛素的叙述，错误的是
A. 水解的最终产物是氨基酸 B. 具有调节细胞代谢的功能
C. 其空间结构在核糖体上形成 D. 可以用双缩脲试剂进行鉴定
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【题目】下图表示细胞中与水分子代谢有关的生理过程，相关叙述错误的是( )
A. 属于生物膜系统的结构有甲、乙、丙
B. 结构甲产生的H2O中的氢来自于葡萄糖和水
C. 结构乙中H2O分解的部位是类囊体薄膜
D. 结构丁上合成多肽链时生成的水分子数等于氨基酸数
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【题目】固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。东北农业大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂（使酶相互连接），海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果（注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率），请分析回答下列问题
（1）测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的__________或产物的________来表示。
（2）从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，甲图所示结果可以得出的结论是_________
（3）乙图曲线表明浓度为________的海藻酸钠包埋效果最好。当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低原因是______________________________________________________________。
（4）固定化酶的活力随使用次数的增多而下降，由丙图可知，固定化酯酶一般可重复使用______________次，酶活力明显下降。
（5）固定小麦酯酶不仅采用海藻酸钠直接包埋，同时用戊二醛作交联剂，这是因为______________________________________________________________。
(6)分离纯化特定的酶，常使用的方法是凝胶色谱法和电泳法。使用凝胶色谱法分离酶，最先分离出来的是分子量________(大或小)的酶分子。使用电泳法分离酶，影响酶电泳速度的因素有____________________________________________________________________。
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【题目】纤维素和壳聚糖都是多糖类化合物，纤维素酶对其都有不同程度的水解作用。下图表示相关的实验研究，相关分析错误的是( )
A. 可以利用富含纤维素的培养基富集能合成纤维素酶的微生物
B. 本实验研究的自变量是pH、温度，酶浓度、底物浓度等为无关变量
C. 纤维素酶对纤维素的水解作用，强于对壳聚糖的水解作用
D. 纤维素酶对两种底物水解作用的差异可能与底物和酶结合部位不同有关
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