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    基因工程中常用的工具酶是                和                。操作过程中，为了将目的基因和运载体连接起来，必须使用                 进行切割，以获得相同的黏性末端。

    限制酶   DNA连接酶   同一种限制酶

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    美国及日本两个研究团队的报告中证实皮肤细胞经过“基因直接重组”后可以转化成为具有胚胎干细胞特性的细胞。这项发现解决了利用胚胎进行干细胞研究的道德争议，另一方面也使得干细胞研究的来源更广泛。请回答下列有关问题。

    （1）人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于＿＿＿＿阶段。

    （2）胚胎工程中的胚胎移植实际上是生产胚胎的＿＿＿＿和孕育胚胎的＿＿＿＿共同繁殖后代的过程。

    （3）美日科学家利用病毒分别将四个基因导入皮肤细胞，促使普通的反肤细胞产生变化，最后成为带有胚胎干细胞性质的细胞。在基因工程中，这四个基因称为＿＿＿＿＿，病毒称为＿＿＿＿，在基因工程中常用的工具酶有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

    （4）如果要在体外大量复制这四个基因，应使用的技术为＿＿＿＿＿，在此过程中用到的酶为＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

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    科目：高中生物 来源： 题型：阅读理解

    下图（一）为某基因工程中利用的质粒筒图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素（抗生素）抗性基因，tctR为四环素（抗生素）抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：

    （1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的      酶；二是将目的基因与运载体拼接的       酶；三是作为运载体的质粒。

    （2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有“          ”、“         ”、“         ”三种，其中有效的（所需要的）基因表达载体是         ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。

    （3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（基因表达载体）与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（基因表达载体）是          。

    （4）有效的基因表达载体成功导入受体细胞进行表达时，首先需要进行转录，RNA聚合酶识别和结合的位点是图（一）中的       。在动物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是              。在植物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是              。是因为这种微生物很容易侵染到                

    中，从而把它的Ti质粒上的              转移到受体细胞染色体的DNA上。

    （5）在基因工程中，作用于图（二）所示a位置的酶是        ；作用于b位置的酶是

                      。

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    科目：高中生物 来源：2012届北京市东城区示范校高三12月综合练习（一）生物试卷 题型：综合题

    一位科学家正在使用氨苄青霉素敏感型菌株进行研究，该菌株不能利用乳糖，这是因为它的乳糖操纵基因异常。该科学家有两种质粒，一种含有正常的乳糖操纵基因，另一种含有氨苄青霉素抗性基因。她运用限制酶和DNA连接酶，获得了一些含有这两个基因的重组质粒。然后在一个仅以葡萄糖为唯一能源的培养基中培养该细菌，并向其中加入高浓度的重组质粒。使细菌增殖。再将实验组细菌（含重组质粒）和对照组细菌（不含重组质粒）放入下表所示环境中让其生长。请回答下列问题：

     
    		葡萄糖
    培养基
    		葡萄糖和
    氨苄青霉素
    		葡萄糖、乳糖和
    氨苄青霉素
    含重组质粒的菌株
    		1号
    		2号
    		3号
    不含重组质粒的菌株
    		4号
    		5号
    		6号
    （1）限制酶是基因工程中常用的工具，若要提取限制酶，可选择的生物是      （举出一例）。本实验中使用限制酶的作用是：                       。
    （2）在以葡萄糖为唯一能源的培养基中，为了促进细菌更好的吸收重组质粒，还应
    用         处理细菌，使细菌处于           。
    （3）若没有新的突变发生，细菌最有可能在哪些培养基上生长出菌落？（  ）
    A．只有1、2和4号           B．只有3、5和6号  
    C．只有1、2、3和4号        D．只有4、5和6号
    （4）如果在准备制作重组质粒时未使用DNA连接酶，则细菌最可能在       号和   
    号平板上长出菌落。
    （5）若该科学家用该培养基进行另一项实验（下图），在该培养基中用乳糖为唯一能源，则细菌能在哪一培养基中长出菌落（ ）
     
    		乳糖培养基
    		乳糖和氨苄青霉素
    含重组质粒的菌株
    		7号
    		8号
    不含重组质粒的菌株
    		9号
    		10号
    A．只有10号    B．只有8号    C．7和8号      D．8和10号

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    科目：高中生物 来源：2010届山东省济宁市一中高三第四次反馈练习理综生物卷 题型：综合题

    美国及日本两个研究团队的报告中证实皮肤细胞经过“基因直接重组”后可以转化成为具有胚胎干细胞特性的细胞。这项发现解决了利用胚胎进行干细胞研究的道德争议，另一方面也使得干细胞研究的来源更广泛。请回答下列有关问题。
    （1）人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于＿＿＿＿阶段。
    （2）胚胎工程中的胚胎移植实际上是生产胚胎的＿＿＿＿和孕育胚胎的＿＿＿＿共同繁殖后代的过程。
    （3）美日科学家利用病毒分别将四个基因导入皮肤细胞，促使普通的反肤细胞产生变化，最后成为带有胚胎干细胞性质的细胞。在基因工程中，这四个基因称为＿＿＿＿＿，病毒称为＿＿＿＿，在基因工程中常用的工具酶有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
    （4）如果要在体外大量复制这四个基因，应使用的技术为＿＿＿＿＿，在此过程中用到的酶为＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

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    科目：高中生物 来源：2010年上海市虹口区高三第二次模拟考试生物试题 题型：综合题

    （8分）下图（一）为某基因工程中利用的质粒简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素（抗生素）抗性基因，tctR为四环素（抗生素）抗性基因。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：

    （1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的              酶；二是将目的基因与运载体拼接的               酶；三是作为运载体的质粒。

    （2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的运载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有：目的基因－目的基因、目的基因－运载体和运载体－运载体三种，其中有效的（所需要的）重组DNA是                  ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。

    （3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（重组DNA）导入无任何抗药性的原核宿主细胞，并接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（重组DNA）是                。含有效的重组基因（目的基因-运载体）的原核宿主细胞在含青霉素的培养基上_________（能/不能）生长。

    （4）在动物基因工程中，将重组DNA导入受体细胞的常用方法是          。

    （5）图（二）中，作用于a 位置的酶是               ；作用于b 位置的酶是                  。

     

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