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(9分)通过基因工程的方法,科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指:利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊,进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中,借助天然的种胚系统,形成含有目的基因的种胚。请回答下列问题:

(1)下列所示的黏性末端是由__________(2分)种限制酶作用产生的。

(2)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞,此过程是基因工程操作步骤中的第三步,即__________。获取目的基因时,如果基因比较小,核苷酸序列又已知,则可以通过DNA合成仪用化学方法直接__________。

(3)该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合,目前经常使用的载体是__________。

(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定,其中分子水平的检测又分三步:首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,采用的技术是__________;其次还要检测__________,方法同样是采用分子杂交技术;最后检测__________,方法是__________杂交。

 

【答案】

(1)4   (2)将目的基因导入受体细胞     人工合成

(3)质粒(其他合理答案也可)

(4)DNA分子杂交技术     基因是否转录出了mRNA     目的基因是否翻译成蛋白质    抗原-抗体

【解析】

试题分析:(1)据图分析限制酶的识别序列为GAATT、CAATT、GTTAA、CTTAA这4种,而酶具有专一性,故需4种不同的限制酶。

(2) 基因工程操作步骤中的第三步为将目的基因导入受体细胞,植物基因工程中一般利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞。如果基因比较小,核苷酸序列又已知,则可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。

(3)基因工程的操作工具中常用的运载体有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等,目前经常使用的是质粒。

(4) 基因工程中分子水平上的检测的方法有:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术。

考点:本题考查了基因工程相关知识,意在考查考生能识记并理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成一定知识网络的能力。

 

练习册系列答案
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科目:高中生物 来源:2012届江苏省南师大附中高三模拟考试(十)生物试卷(带解析) 题型:综合题

(9分)为扩大可耕地面积,增加粮食产量,沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系。请据图回答下列问题:

图1 转基因操作流程图

表2 几种限制酶识别序列及切割位点表
(1) 获取真核生物的基因通常采用人工合成法,通过图示中①方法合成的耐盐碱基因中是不含____________的,如果要将耐盐碱基因和质粒重组,应该在基因两侧的A和B位置除了接上以上两个结构外还需分别加入____________限制酶识别序列,这样设计的优点有利于质粒和目的基因定向连接。
(2) 过程②采用PCR技术扩增目的基因时,在PCR反应体系需加入引物Ⅰ和引物Ⅱ等物质,若目的基因扩增4代,则共用了引物Ⅰ________个。
(3) 请画出Pst Ⅰ切割DNA形成黏性末端的过程:__________________________。
(4) 图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌,而是先将其导入大肠杆菌,目的是____________________。
(5) 在步骤⑤⑥过程中都需用__________________________处理两类细菌。为了确认目的基因通过⑦过程导入植物细胞中后是否成功表达,通常从分子水平进行检测的方法是用____________法。
(6) 假设该抗盐碱基因D,通过基因工程导入水稻后连接到水稻的一条染色体上,则该水稻进行减数分裂的细胞在联会时有________个D基因。

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科目:高中生物 来源:2012届新疆乌鲁木齐一中高三第一次月考生物试卷 题型:综合题

(共13分)随着人们生活水平的提高,乳制品需求越来越大,为了扩大生产,提高产崽率,进行良种牛的培育。下图为早期胚胎发育过程及胚胎移植的基本程序,请据图回答:

(1)乙图所示操作程序中,在供体母牛超数排卵后,除采用供体公牛配种的方法外,还可以采用                  方法产生胚胎。
(2)乙图中的冲卵实质上是用特定装置将供体母牛子宫内的                冲洗出来。
(3)甲图①~⑥中,适宜于牛的胚胎移植时期有                    (填序号)。
(4)受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生        反应,这为胚胎在受体子宫内的存活提供了可能。
(5)胚胎发育的早期有一段时间是在透明带内进行的,这一时期称为       期,在发育过程中,胚胎总体积进一步扩大,导致透明带破裂,胚胎从其中伸展出来,这一过程叫做              
(6)甲图中标号⑤为      ,其中沿内壁扩展排列的较小的细胞是         细胞,将来发育为胎膜和胎盘。
(7)为了研究细胞分化,可从甲图④          (结构)中获取,胚胎干细胞在功能上,具有发育的           
(8)若希望通过胚胎分割获得同卵双胎,可将甲图中结构⑤的               均等分割。
(9)若希望通过基因工程,从牛的乳汁中分离出大量的人血清白蛋白,应选择甲图中的
            细胞作为目的基因(血清白蛋白基因)的受体细胞,将人的血清白蛋白基因导入该细胞时,常使用的方法是             

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科目:高中生物 来源:2013-2014学年江苏阜宁中学高三第三次调研测试生物卷(解析版) 题型:综合题

(9分)请回答下列有关温度与酶活性的问题:

(1)温度对唾液淀粉酶活性影响的实验:

将盛有2mL唾液淀粉酶溶液的试管和盛有2mL可溶性淀粉溶液的试管编为一组,共四组。在0℃、20℃、37℃和100℃水浴中各放入一组,维持各自的温度5min。然后,将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后继续放回原来的温度下保温。把________的时间作为本实验的起始时间记录下来。再每隔一分钟,取一滴混合液滴在盛有碘液的点滴板上进行观察,记录每种混合液蓝色消失的时间。通过比较混合液中____消失所需时间的长短来推知酶的活性。预计___温度下混合液因其中的酶失去活性蓝色不会消失。

(2)温度对酶活性的影响主要体现在两个方面。其一,随温度的升高会使___接触的机会增多,反应速率变快。其二,因为大多数酶是蛋白质,随温度升高____会发生改变,温度升到一定程度,酶将完全失活。这两种作用叠加在一起,使酶促反应在某一温度下最快,这一温度就是该酶的__。

(3)科研人员通过蛋白质工程来设计改变酶的构象。在研究溶菌酶的过程中,得到了多种突变酶,测得酶50%发生变性时的温度(Tm),部分结果见下表:

半胱氨酸(Cys)的位置和数目

二硫键数目

Tm/℃

野生型T4溶菌酶

Cys51,Cys97

41.9

突变酶C

Cys21,Cys143

1

52.9

突变酶F

Cys3,Cys9,Cys21,Cys142,Cys164

3

65.5

(注:Cys上角的数字表示半胱氨酸在肽链的位置)

溶菌酶热稳定性的提高,是通过改变__和增加___得以实现的。从热稳定性高的酶的氨基酸序列出发,利用___方法获得目的基因,通过基因工程的手段,可以生产自然界中不存在的蛋白质。

 

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科目:高中生物 来源:2011-2012学年江苏省高三模拟考试(十)生物试卷(解析版) 题型:综合题

(9分)为扩大可耕地面积,增加粮食产量,沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系。请据图回答下列问题:

图1 转基因操作流程图

表2 几种限制酶识别序列及切割位点表

(1) 获取真核生物的基因通常采用人工合成法,通过图示中①方法合成的耐盐碱基因中是不含____________的,如果要将耐盐碱基因和质粒重组,应该在基因两侧的A和B位置除了接上以上两个结构外还需分别加入____________限制酶识别序列,这样设计的优点有利于质粒和目的基因定向连接。

(2) 过程②采用PCR技术扩增目的基因时,在PCR反应体系需加入引物Ⅰ和引物Ⅱ等物质,若目的基因扩增4代,则共用了引物Ⅰ________个。

(3) 请画出Pst Ⅰ切割DNA形成黏性末端的过程:__________________________。

(4) 图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌,而是先将其导入大肠杆菌,目的是____________________。

(5) 在步骤⑤⑥过程中都需用__________________________处理两类细菌。为了确认目的基因通过⑦过程导入植物细胞中后是否成功表达,通常从分子水平进行检测的方法是用____________法。

(6) 假设该抗盐碱基因D,通过基因工程导入水稻后连接到水稻的一条染色体上,则该水稻进行减数分裂的细胞在联会时有________个D基因。

 

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