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    【题目】下图为苹果醋的工业生产流程，以及实验室分离、纯化发酵菌的方法步骤。请回答以下问题：

    纯化发酵菌的方法步骤:配制培养基→培养基灭菌→接种→培养→挑选符合要求的菌落。

    （1）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是___________，因此需对培养基和培养皿进行灭菌，空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使破坏DNA的结构，也能使蛋白质___________。

    （2）上图中①过程与②过程需要接种的发酵菌分别是_____________________。

    （3）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行涂布，每种稀释液都设罝了3个培养皿。从对照实验的角度看，还应设置的一组对照组是___________________，设置对照组的目的是______________________。

    （4）对同一浓度的发酵菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作， 则前者的数量___________（填“多于”、“等于”或“小于”）后者，其原因是____________________。

    【答案】 防止外来杂菌的入侵 变性（空间结构破坏） 酵母菌和醋酸菌 不接种的空白培养基 证明培养基制备过程中是否被杂菌污染 多于 有些菌落连接在一起，计数偏小

    【解析】试题分析：本题考查果酒和果醋的制作、微生物的分离和纯化，意在考查学生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性；醋酸菌是好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。统计菌落数目的方法有稀释涂布平板法和利用显微镜直接计数法。其中稀释涂布平板法是活菌计数法，注意要选择菌落数为30-300的平板进行计数，在接种时还要设置空白对照。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。

    （1）微生物培养时，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵；对于培养基和培养皿需要进行灭菌处理，人的双手需要消毒处理；空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能让蛋白质变性，同时还能破坏DNA的结构。

    （2）图中①过程是制作果酒的过程，使用的微生物菌种是酵母菌；②过程是制作果醋的该过程，使用的微生物菌种是醋酸菌。

    （3）实验设计过程应遵循对照原则，该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备过程中是否被杂菌污染。

    （4）血球计数板计数法，统计的是直接看到的细菌，无论死活都会被记录上。相比之下平板计数法只能统计活的且能在所使用的平板上生长繁殖的细菌。此外平板计数法统计的是菌落数而不是细菌的个数，有些菌落连接在一起，那么只能形成一个菌落，计数偏小。

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