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【题目】为验证维生素E能延长红细胞体外保存时间,请根据以下提供的材料和用具,以血浆中的血红蛋白、红细胞内ATP含量为测定指标,完善实验思路,预测实验结果并进行分析与讨论。

材料与用具:人红细胞悬液(血浆+红细胞)、阿维氏保存液(用以保存红细胞)、维生素E、人血红蛋白试剂盒、ATP试剂盒、红细胞保存袋、恒温箱等。

(要求与说明:各种检测的具体方法不做要求,不考虑加入物质对体积的影响,实验条件适宜)

(1)实验思路:

①将等量人红细胞悬液加入A、B两组红细胞保存袋,A组各袋中加入适量且等量的阿维氏保存液,

__________________________________________________

(2)预测实验结果(在坐标中以曲线图表示实验结果)

_____________

(3)分析与讨论:

阿维氏保存液中含有葡萄糖与氯化钠等,其中葡萄糖可以提供红细胞生存所需能量,氯化钠的作用是______________________。活细胞中ATP含量下降,致使红细胞活力降低。在ATP 的作用下,ATP试剂盒中的荧光素酶催化荧光素发出荧光。在测定细胞内ATP含量前应该_________红细胞。

【答案】 ①B组个袋中加入与A组等量阿维氏保存液和适量且等量维生素E。

②用人血红蛋白试剂盒、细胞ATP试剂盒分别检测两组红细胞,保存袋中的血浆中的血红蛋白和细胞内ATP,并记录。

③将两组红细胞保存袋放在恒温箱中4℃条件下保存。

④每隔一段时间,重复步骤②。

⑤统计和分析所得数据。 维持渗透压 裂解(破裂、涨破)

【解析】本题结合动物细胞培养考查验证维生素E能延长红细胞体外保存时间的实验,要求考生掌握相关的实验理论,能利用相关实验理论分析题给信息,按照对照实验的设计原则设计实验步骤,并能对实验结果进行预期和分析。

(1)根据题意可知,本实验的目的是验证维生素E能延长红细胞体外保存时间,属于验证性实验,其自变量为红细胞体外保存的液体中释放添加维生素E,因变量为不同保存时间内血浆中的血红蛋白含量及细胞内ATP含量;对照实验的设计应遵循单一变量原则和对照原则,因此应将实验分为A、B两组,A组作为对照组其保存液中不添加维生素E,B组作为实验组其保存液中应添加维生素E,除是否添加维生素E以外,A、B两组其它量均应该相同且适宜;在保存过程中,每隔一定的时间应检测血浆中的血红蛋白含量及细胞内ATP含量并记录。其实验思路具体如下

①将等量人红细胞悬液加入A、B两组红细胞保存袋,A组各袋中加入适量且等量的阿维氏保存液,B组个袋中加入与A组等量阿维氏保存液和适量且等量维生素E。

②用人血红蛋白试剂盒、细胞ATP试剂盒分别检测两组红细胞,保存袋中的血浆中的血红蛋白和细胞内ATP,并记录。

③将两组红细胞保存袋放在恒温箱中4℃条件下保存。

④每隔一段时间,重复步骤②。

⑤统计和分析所得数据。

(2)验证性实验的实验结果和结论都是唯一的,即实验结果要能支持实验结论;根据本实验的目的可知,本实验的实验结论应该是:维生素E能延长红细胞体外保存时间;因此实验结果必需支持这一结论,故根据上述实验思路,预测实验结果如下:

(3)分析与讨论:阿维氏保存液中含有葡萄糖与氯化钠等,其中葡萄糖可以提供红细胞生存所需能量,无机盐氯化钠的作用是维持渗透压。活细胞中ATP含量下降,致使红细胞活力降低。在ATP 的作用下,ATP试剂盒中的荧光素酶催化荧光素发出荧光,而正常情况下ATP存在于细胞内部,因此在测定细胞内ATP含量前应该裂解(破裂、涨破)红细胞。

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(3)图2中的FasL又称“死亡因子”,Fas又称“死亡因子受体”,它们都是由细胞合成并定位于细胞表面的蛋白质。

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