Question

1．根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌、尿细菌、纤维杆菌分离开来．下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容：首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌．再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养．
（1）在无氧环境下培养混合菌，乳酸菌和酵母菌可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制酵母菌的生长，利用菌落特征，结合显微镜镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出乳酸菌．
（2）利用无氮培养基可筛选出圆褐固氮菌．
（3）用不含有机碳源的选择培养基可筛选出硝化细菌．
（4）酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入青霉菌．
（5）用含较高浓度NaCl的培养基可选择出金黄色葡萄球菌；或者根据菌落的颜色呈现金黄 色，将其挑取单独培养．
（6）利用伊红和美蓝培养基培养混合菌，菌落呈深紫色并带有金属光泽的是大肠杆菌，挑取该菌落单独培养，结合显微镜镜检和进一步用伊红和美蓝鉴别培养基来确定．
（7）若筛选能分解尿素的细菌，则配制的培养基特点是氮源只含尿素．

Answer 1

分析 解答本题需掌握：根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜镜检以及菌落特征来解题，例如：
（1）自养生物能利用无机氮源，培养时培养基中不加入有机碳源，自身固氮菌能固氮，培养时不加入有机氮源；
（2）利用青霉素可筛选酵母菌，利用伊红和美蓝可鉴定大肠杆菌．

解答 【解答】解：（1）无氧条件下乳酸菌和酵母菌可以生长，加入一定浓度乳酸可以抑制酵母菌的生长，随后筛选出乳酸菌．
（2）无氮培养基可筛选出能固氮的微生物，即圆褐固氮菌．
（3）不含有机碳源的选择培养基可筛选出自养型微生物，即硝化细菌．
（4）酵母菌是真菌，筛选时常在培养基中加入抗生素，防止其他细菌的生长．
（5）用含较高浓度NaCl的培养基可选择出金黄色葡萄球菌；或者根据金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色，将其挑取单独培养．
（6）利用伊红和美蓝培养基可用来培养和鉴定大肠杆菌，菌落呈黑色并带有金属光泽．
（7）以尿素为唯一氮源的培养基上筛选尿素分解菌．
故答案为：1）乳酸菌和酵母菌       酵母菌      乳酸菌
（2）圆褐固氮菌
（3）硝化细菌
（4）青霉素（或抗生素）
（5）金黄色葡萄球菌     金黄
（6）深紫    大肠杆菌
（7）氮源只含尿素．

点评 本题考查微生物的分离和培养相关知识，意在考查考生对相关知识点的识记、理解和运用能力，把握知识间内在联系，构建知识网络．