Question

【题目】下列关于凝胶色谱法分离蛋白质和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的叙述不正确的是

A. 在装填凝胶色谱柱时，一旦发现柱内有气泡存在，就需要重装

B. 凝胶色谱分离蛋白质时，大分子蛋白质因阻力大而移动慢，所以最后洗脱出来

C. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，凝胶中加入的SDS可使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小

D. 因SDS带负电，故电泳时应在负极一侧点样

Answer 1

【答案】B

【解析】

凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法。凝胶色谱法分离蛋白质的原理是：相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动的速度较慢。相对分子质量大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动的速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。电泳法是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异及分子本身大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。在测定蛋白质分子时通常采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷的量，因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。

在装填凝胶色谱柱时，凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在，因为气泡会影响蛋白质洗脱的次序，因此一旦发现柱内有气泡存在，就需要重装，A正确；凝胶色谱分离蛋白质时，大分子蛋白质因不能进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程短，移动速度快，所以最先洗脱出来，B错误；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，凝胶中加入的SDS可使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小，C正确；因SDS带负电，故电泳时应在负极一侧点样，D正确。