Question

【题目】科研人员将拟南芥GolS2基因导入水稻体内后，设法使该基因过量表达，产生了较多的糖类化合物，从而大大提升了植株的抗旱能力。回答下列问题：

（1）用_________________技术可以在体外大量合成拟南芥GolS2基因。

（2）科学家设法使GolS2基因在水稻体内过量表达，是科学家对运载体上的_______进行修饰的结果，该组件的功能：__________________________。

（3）为使GolS2基因整合到水稻染色体上，常将目的基因拼接到___________上，然后再通过______________方法获得稳定遗传的转基因水稻。

（4）细胞内糖类化合物含量增多就能提高抗旱能力，原因是_______________________。

（5）对导入了基因表达载体的细胞需进行组织培养，诱使细胞脱分化时需在无菌环境下进行，另外还需满足的条件为________________________。

Answer 1

【答案】PCR 启动子 是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录 Ti-质粒 自交（然后筛选） 细胞液浓度增加，可大大提高根细胞的吸水（或保水）能力 离体、植物激素调节、适宜的温度和pH

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）用PCR技术可以在体外大量合成拟南芥GolS2基因。

（2）GolS2基因的表达离不开启动子的驱动，启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录。

（3）Ti-质粒上存在T-DNA，将目的基因插入T-DNA片段中，可使目的基因很容易转移到染色体上。然后通过自交的方法使基因纯合，但是需要淘汰不合要求的个体，直至不发生性状分离为止。

（4）细胞内GolS2基因的过量表达，使得细胞内糖类增多，增加了细胞液的浓度，进而使细胞吸水或保水能力增加。

（5）对导入了基因表达载体的细胞需进行组织培养，诱使细胞脱分化时需在无菌环境下进行，另外还需满足的条件为离体、植物激素调节、适宜的温度和pH。