Question

【题目】下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉索抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。能驱动人乳铁蛋白基因的乳腺细胞中特异性表达的调控因子是图中的 。过程①采用的操作方法通常是 。

（2）过程②采用的生物技术是_______。对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。目前最常见的是经分割产生的同卵 胎。

（3）为检测人乳铁蛋白基因是否成功表达，可采用 技术。

（4）对代孕牛的要求是 。

Answer 1

【答案】

（1）HindⅢ和BamHⅠ 氨苄青霉 启动子 显微注射法。

（2）胚胎移植 双（1分）

（3）抗原—抗体杂交

（4）有健康体质和正常繁殖能力

【解析】

试题分析：

（1）图中信息显示：人乳铁蛋白基因的两端和载体上都有BamHⅠ和HindⅢ的酶切位点，因此将人乳铁蛋白基因插入载体，需用HindⅢ和BamHⅠ限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。因人乳铁蛋白基因的插入，使得重组载体中的四环素抗性基因（tetR）遭到破坏，但氨苄青霉索抗性基因（ampR）结构完好，因此筛选含有重组载体的大肠杆菌，首先需要在含氨苄青霉的培养基上进行。启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA，据此可知：能驱动人乳铁蛋白基因的乳腺细胞中特异性表达的调控因子是图中的启动子。过程①是将重组载体导入供体牛的受精卵中，采用的操作方法通常是显微注射法。

（2）过程②是将早期胚胎移入受体，采用的生物技术是胚胎移植。采用胚胎分割技术对早期胚胎进行切割从而获得新个体，目前最常见的是经分割产生的同卵双胎。

（3）人乳铁蛋白基因是目的基因，检测目的基因是否成功表达，可采用抗原—抗体杂交技术。 （4）在胚胎移植时，对受体（代孕牛）的要求是有健康的体质和正常繁殖能力。