Question

人的HPRT基因缺陷（HPRT^-）细胞和小鼠的TK基因缺陷（TK^-）细胞在HAT培养基中都不能存活．杂种细胞在分裂中随机丢失人的染色体，但保留所有的鼠染色体．因此，利用人-鼠细胞融合技术可以将人类基因定位于特定的染色体上．

（1）将人的HPRT^-细胞与小鼠的TK^-细胞用

 

促进融合，然后培养在

 

培养基（HAT）中，最终筛选出人-鼠杂种细胞．
（2）将存活下来的杂种细胞进行

 

培养，获得不同的细胞株，用

 

染色后镜检，观察结果如下：

细胞株编号	1	2	3	4	5	6
所含人染色体编号	11，14， 17，22	7，11， 14，17	5，7， 17，21	2，9， 11，17	5，17， 18，20	2，5， 17，19

由此可推测

 

基因在

 

染色体上．
（3）如果要确定人鸟苷酸（UMP）激酶基因所在染色体，应选择UMP激酶缺陷的

 

（填“人”或“鼠”）细胞与相应细胞杂交，这样的方法

 

（填“能”或“不能”）对小鼠的基因进行定位．
（4）经过基因测序发现UMP激酶缺陷是因为编码它的基因中部的部分碱基替换造成的，结果可能导致

 

A．转录不能进行                            B．合成的蛋白质分子缺少部分氨基酸序列
C．合成的蛋白质分子增加部分氨基酸序列         D．合成的蛋白质分子氨基酸数目不变．

Answer 1

考点：动物细胞与组织培养过程,基因突变的特征

专题：

分析：动物细胞培养的基本过程：取动物胚胎或幼龄动物器官、组织．将材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液．悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，成为细胞贴壁．当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制．此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理．再配成一定浓度的细胞悬浮液．

解答： 解：（1）将人的HPRT^-细胞与小鼠的TK^-细胞用PEG（或灭活病毒）促进融合，然后培养在选择培养基（HAT）中，最终筛选出人-鼠杂种细胞．
（2）将存活下来的杂种细胞进行单克隆培养，获得不同的细胞株，用碱性染料（或龙胆紫或醋酸洋红）染色后镜检．根据表格中的数据可推测，TK基因在17染色体上．
（3）如果要确定人鸟苷酸（UMP）激酶基因所在染色体，应选择UMP激酶缺陷的鼠细胞与相应细胞杂交，这样的方法不能对小鼠的基因进行定位．
（4）经过基因测序发现UMP激酶缺陷是因为编码它的基因中部的部分碱基替换造成的，结果可能导致B．合成的蛋白质分子缺少部分氨基酸序列和D．合成的蛋白质分子氨基酸数目不变．
故答案为：
（1）PEG（或灭活病毒）          选择
（2）单克隆            碱性染料（或龙胆紫或醋酸洋红）         TK        17
（3）鼠                       不能
（4）BD

点评：本题主要考查学生对知识的理解和分析能力．通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株．当培养超过50代时，大多数的细胞已经衰老死亡，但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性，即癌变．此时的细胞被称为细胞系．