Question

【题目】科研人员将对绒毛生长有促进作用的胰岛素样生长因子基因(IGF-1G)导入山羊成纤维细胞内，再进行体细胞克隆获得转基因克隆绒山羊，其操作流程如下图所示。请回答下列问题：

(1)过程甲在构建基因表达载体时，必须使用的工具酶是___________。基因表达载体上有RNA聚合酶的识别和结合位点，可驱动IGF-1G转录，该部位被称为___________。

(2)过程乙在核移植构建重组细胞时，需要先除去___________的核，目的是____________________________________________。

(3)培养重组细胞的过程中，向培养液中通入一定浓度CO2的目的是___________________。

(4)过程丁通常将发育至___________期的早期胚胎移入代孕母羊的子宫内发育。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的___________。

Answer 1

【答案】限制酶和DNA连接酶 启动子 卵母细胞 保证核遗传物质来自含IGF-IG（或目的基因、转胰岛素样生长因子基因）的成纤维细胞 维持培养液pH的稳定（或维持培养液的pH） 桑椹胚或囊胚 全能性

【解析】

本题以“培育转基因克隆绒山羊”的操作流程图为情境，考查学生对基因工程的基本操作程序、核移植技术、动物细胞培养、胚胎移植等相关知识的识记和理解能力。

(1) 在构建基因表达载体时，需使用限制酶切割含有目的基因（IGF-1G）的DNA片段和载体，再用DNA连接酶将切割后所获得的目的基因和载体连接起来形成重组DNA分子，即必须使用的工具酶是限制酶和DNA连接酶。基因表达载体上的启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合位点，可驱动IGF-1G转录出mRNA。

(2) 为了保证核遗传物质来自含IGF-IG的成纤维细胞，在核移植构建重组细胞时，需要先除去卵母细胞的细胞核。

(3) 培养重组细胞需借助动物细胞培养技术，在此过程中，向培养液中通入一定浓度CO2的目的是维持培养液的pH。

(4) 过程丁表示胚胎移植。在进行胚胎移植时，通常选择发育至桑椹胚或囊胚期的早期胚胎。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这说明早期胚胎细胞具有全能性。