Question

12．关于果酒和果醋的制作的实验，请回答下列问题：
I．（1）果酒和果醋的制作分别利用了酵母菌和醋酸杆菌两种微生物的发酵原理．后者在结构上的主要特点是无成形的细胞核．
（2）影响上述微生物发酵的主要因素有氧气、温度（两项即可）．
（3）在制葡萄酒的过程中，在不同时间内对发酵液样品进行检测，发现发酵液的pH一直下降，原因是酵母菌呼吸作用产生的二氧化碳使发酵液pH值下降．
II．在培养菌种时，为了检测菌种，以无菌操作技术进行以下实验操作：
①将1g样品溶于无菌水，定容为10ml．
②对上述菌液进行4次梯度稀释：取1ml前一种稀释菌液+9ml无菌水，摇匀．
③吸取0.1ml最后一次稀释所得菌液涂布于细菌培养基平板上．
④将平板放在37°C恒温环境中培养24h后，计数平板上菌落数目．假如计数得平板菌落数为5．
（1）题中所采用的计数法是稀释涂布平板法，样品含活菌数约为5×10⁶个/g．样品的实际含菌数比这个数据多（填多、少），原因是某些菌落可能由多个（两个以上）的酵母菌繁殖而来．
（2）为了使所得菌体数目更加准确，应该多涂布几个平板，再计算平板菌落数的平均值．

Answer 1

分析 1、果酒制作时使用的是酵母菌，酵母菌适宜在缺氧、含糖量高、呈酸性的溶液中大量繁殖，酵母菌发酵的适宜温度是18℃～25℃；果醋制作使用的是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，醋酸菌发酵的适宜温度是30℃～35℃．
2、稀释涂布平板法常用来进行微生物的分离、筛选与计数．用该方法进行计数要比实际数目偏少．为计数准确常常需要进行重复实验．

解答 解：I．（1）果酒和果醋的制作分别利用了酵母菌和醋酸杆菌两种微生物的发酵原理．酵母菌是真核生物，醋酸杆菌是原核生物，后者在结构上的主要特点是无成形的细胞核．
（2）影响上述微生物发酵的主要因素有氧气、温度．
（3）在制葡萄酒的过程中，在不同时间内对发酵液样品进行检测，酵母菌呼吸作用产生的二氧化碳使发酵液pH值下降．
Ⅱ（1）根据题意，题目中的计数方法为稀释涂布平板法，样品含活菌数约为50÷0.1×10⁴=5×10⁶个/g．由于某些菌落可能由多个（两个以上）的酵母菌繁殖而来，所以样品的实际含菌数比这个数据要多．
（2）为了使所得菌体数目更加准确，应该多涂布几个平板，再计算平板菌落数的平均值．
故答案为：
I（1）醋酸杆菌      无成形的细胞核
（2）氧气、温度
（3）酵母菌呼吸作用产生的二氧化碳使发酵液pH值下降
II（1）稀释涂布平板法   5×10⁶    多    某些菌落可能由多个（两个以上）的酵母菌繁殖而来
（2）多涂布几个平板，再计算平板菌落数的平均值

点评 本题考查果酒和果醋的制作，稀释涂布平板法的计数，意在强化学生对微生物计数的相关知识的理解与掌握．是一道基础性题目．