Question

【题目】尿素是一种重要的农业氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图筛选出能高效降解尿素的细菌．设计了“土壤中分解尿素细菌的筛选与计数实验”，过程如图所示：
（1）在接种前，进行①～⑤系列操作的意图是 ． 据题意，每次为使菌液稀释10倍，应加入的无菌水量是mL．
（2）为达到实验目的，本实验所配置的培养基成分不应包括（填入下列序号）；原因是 ． 制备该无菌培养基的步骤为“计算→称量→溶解→灭菌→倒平板”，其中调节pH应该在（填步骤名称）之前． ①水②无机盐（不含氮） ③NH4 NO3④尿素⑤葡萄糖⑥牛肉膏⑦蛋白胨⑧琼脂
（3）本实验采用的接种工具是 ． 微生物的不同接种技术的操作方法各不相同，但其核心都是 ．
（4）某同学接种了3个培养皿，一段时间后三个培养皿中分别长出了54个，46个，50个菌落，根据实验结果，该1g土壤样本中约有分解尿素的细菌个．

Answer 1

【答案】
（1）使菌液按一定的梯度稀释；9
（2）③、⑥、⑦；培养基中只有以尿素为唯一的氮源，才能起到选择作用；灭菌
（3）涂布器；防止杂菌污染
（4）5×107
【解析】解：（1）在接种前，进行①～⑤系列操作的意图是使菌液按一定的梯度稀释．根据题意，为使菌液稀释10倍，菌液取1mL，则每次应加入的无菌水量是9mL．（2）微生物培养基的成分主要包括碳源、氮源、水、无机盐，碳源选择⑤葡萄糖；要筛选能够分解尿素细菌，需要加入④尿素作为唯一氮源；对细菌进行计数时需要利用稀释涂布平板法，因此需要在培养基中加入⑨琼脂作为凝固剂；另外①水和②无机盐（不含氮）是培养基必需的．因此，为达到实验目的，本实验所配置的培养基成分不应包括③、⑥、⑦； 培养基配置的基本过程：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤，即调pH值应该在灭菌之前．（3）为能够进行菌落计数，本实验应采用稀释涂布平板法，接种工具为涂布器．微生物的不同接种技术的操作方法各不相同，但其核心都是防止杂菌污染． （4）根据图解可知，对菌液进行稀释时共稀释了106倍，乙同学分别接种了3个培养皿，一段时间后三个培养皿中分别长出了54个、46个、50个菌落，根据甲的实验结果，该1g土壤样本中约有分解尿素的细菌=（54+46+50）÷3×106=5×107个． 所以答案是：（1）使菌液按一定的梯度稀释 9（2）③、⑥、⑦ 培养基中只有以尿素为唯一的氮源，才能起到选择作用 灭菌（3）涂布器 防止杂菌污染（4）5×107