Question

基因工程又叫做基因拼接技术．该技术能够通过对生物的基因进行改造和重新组合，产生出人类所需要的基因产物．自20世纪70年代基因工程发展起来以后，人们开始采用高新技术生产各种基因产品．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1和图2示基因工程部分操作过程：

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	EcoRⅠ	SmaⅠ
识别序列及切割位点	G↓GATCC CCTAG↑G	A↓AGCTT TTCGA↑A	G↓AATTC CTTAA↑G	CCC↓GGG GGG↑CCC

（1）从表中四种酶的切割位点看，可以切出平末端的酶是

 

．
（2）将目的基因与质粒DNA缝合时，两条链上的磷酸、脱氧核糖在

 

酶的作用下连接起来，形成磷酸二酯键；两条链间的碱基对通过

 

连接起来．
（3）图2中的质粒分子可被表中

 

酶切割，切割后的质粒含有

 

个游离的磷酸基团．
（4）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越

 

．
（5）在相关酶的作用下，甲与乙能否拼接起来？并说明理由：

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．

解答： 解：（1）由表格中四种限制酶切割位置可知，SmaⅠ可切出平末端．
（2）目的基因与质粒缝合时用DNA连接酶进行连接，形成磷酸二酯键，两条链之间的碱基通过碱基互补配对原则形成氢键．
（3）根据质粒的碱基序列可知，质粒分子可被EcoRⅠ酶切割，切割后形成链状DNA，有2个游离的磷酸基团．
（4）热稳定性越高的DNA分子中C-G配对越多，可知，SmaⅠ酶切割的序列中碱基对都是C-G，所以SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高．
（5）由图可知，甲和乙的黏性末端相同，在DNA连接酶的作用下可以拼接起来．
故答案为：
（1）Sma I酶
（2）DNA连接     氢键
（3）EcoR I     2
（4）高
（5）能．二者具有相同的黏性末端

点评：本题考查基因工程相关知识，解题的关键是理解限制酶的作用特点．