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    4．某生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如表所示，实验步骤如图所示．请分析回答下列问题：
    KH2PO41.4g
    Na2HPO42.1g
    MgSO4•7H2O0.2g
    葡萄糖10g
    尿素1g
    琼脂15g
    溶解后自来水定容到1 000mL
    （1）培养基的制备步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板．培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌．
    （2）实验需要振荡培养，原因是为目的菌提供氧气．转为固体培养时，常采用涂布平板法接种，获得单菌落后继续筛选．
    （3）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻璃棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体．其中需要灭菌的是①②（填序号）．
    （4）以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入酚红指示剂后变红，说明“目的菌”能分解尿素，理由是细菌合成的脲酶将尿素分解为氨和CO2，pH升高，使酚红指示剂变红．
    （5）为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24～48h，观察并统计具有红色环带的菌落数，结果见表，其中106和105倍的稀释比较合适．
    稀释倍数103104105106107
    菌落数＞5003672483618

    分析 1、微生物常见的接种的方法
    ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
    ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
    2、选择培养基是在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长．
    3、消毒和灭菌

     消毒灭菌
    概念使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
    常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
    适用对象操作空间、某些液体、双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

    解答 解：（1）培养基的制备步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板．该实验的目的是筛选到能高效降解尿素的细菌．
    （2）由于分解尿素的菌是需氧微生物，因此震荡培养的目的是为目的菌提供氧气．转为固体培养时，常采用稀释涂布平板法接种，获得单菌落后继续筛选．
    （3）为了保证培养物不被污染，对培养细菌用的培养基与培养皿和玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管要进行灭菌，实验操作者的双手要进行消毒．
    （4）尿素被分解尿素的菌氧化成氨气，氨气会使培养基碱性增强，pH升高，指示剂酚红变红，因此以通过在培养基中加入酚红指示剂，检测培养基pH的变化来判断尿素是否被分解．
    （5）观察并统计菌落数应选30-300之间的培养皿进行统计，故应选106或105倍的稀释比较合适．
    故答案为：
    （1）灭菌 　  筛选目的菌
    （2）为目的菌提供氧气　  涂布平板
    （3）①②
    （4）脲    氨        
    （5）106和105

    点评 本题是对用于微生物培养的培养基的配方及营养成分、选择培养基的选择作用、常用的接种方法、无菌操作技术、对分解尿素的菌的鉴定等相关知识的综合性考查，回忆微生物培养的培养基的配方和营养成分、选择培养基的选择作、常用的接种方法的具体操作和目的，无菌操作技术、对分解尿素的菌的鉴然后结合问题进行解答．

    练习册系列答案
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    B．生物体产生配子时成对遗传因子彼此分离
    C．若F1产生配子时成对遗传因子分离，则测交后代会出现两种性状，比例接近1：1
    D．若F1产生配子时成对遗传因子分离，则F2中三种基因型个体比接近1：2：1

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