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    7．GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用．研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究．请回答：

    （1）在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是使细胞分散开．
    （2）基因工程中最常用的载体是质粒．构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的XhoⅠ限制酶进行酶切．基因表达载体中必须有启动子、终止子、标记基因、目的基因等三部分．
    （3）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）．为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示．图中第②泳道显示所鉴定的载体是正向连接的．
    （4）将正向连接的表达载体导入神经干细胞的方法是显微注射技术．当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行传代培养以得到更多数量的细胞．
    （5）科学家使用转基因动物生产药物时通常将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起导入哺乳动物的受精卵中，使转基因动物通过分泌的乳汁来生产药物，此转基因动物被称作乳腺生物反应器．

    分析 1、基因工程技术的基本步骤：
    （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
    （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
    2、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．

    解答 解：（1）动物细胞培养时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶作用，使细胞分散开．
    （2）基因工程中最常用的载体是质粒．质粒上有XhoⅠ识别位点，而且在启动子之后，所以选用XhoⅠ限制酶进行酶切．基因表达载体中必须有启动子、终止子、标记基因、目的基因等部分．
    （3）泳道①仅有一种条带，属于载体自连；泳道②有两种条带，且长度分别与质粒和GDNF基因长度相同，为正向连接；泳道③有两种条带，长度与BamHⅠ酶切后结果相同，为反向连接．
    （4）将正向连接的表达载体导入神经干细胞的方法是显微注射技术．培养动物细胞采用动物细胞培养法，当细胞密度达到一定程度，需要进行分瓶，进行传代培养．
    （5）科学家使用转基因动物生产药物时通常将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起导入哺乳动物的受精卵中，使转基因动物通过分泌的乳汁来生产药物，此转基因动物被称作乳腺生物反应器．
    故答案为：
    （1）使细胞分散开
    （2）质粒   XhoⅠ终止子    标记基因    目的基因
    （3）②
    （4）显微注射技术    传代
    （5）乳腺蛋白基因的启动子    乳腺生物反应器

    点评 本题考查基因工程、动物细胞培养的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤等，掌握各步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确判断各选项．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    17．如图表示叶绿体中光合作用的过程，其中①表示结构，②③表示物质．请回答下列问题：

    （1）图中①表示类囊体，其上的色素主要吸收红光和蓝紫光光，②表示三碳酸．
    （2）光反应过程中，水在光下裂解产生H+和氧气．碳反应生成的三碳糖大部分运至叶绿体外，转变成蔗糖供植物体所有细胞利用．
    （3）光合作用正常进行时，若光照突然减弱，则在较短时间内叶绿体中RuBP的含量将减少．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    18．下列培养基不是选择培养基的是（　　）
    A．牛肉膏蛋白胨培养基B．仅以尿素为氮源的培养基
    C．筛选纤维素分解菌的培养基D．无氮培养基

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    15．如图为果蝇体内某个细胞的示意图，下列相关叙述正确的是（　　）
    A．如果对果蝇基因组进行测序，需要测5条染色体上的基因
    B．该个体的细胞中染色体组最多4个，最少2个
    C．图中的染色体1、5、7、8可组成一个染色体组
    D．含有基因B、b的染色体片段发生交换属于染色体结构变异

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    2．将基因型为Aa用秋水仙素处理幼苗得植株D基因型为AAaa．下列有关叙述正确的是（　　）
    A．植株D属四倍体，所有细胞均有四个染色体组
    B．用D的花粉直接培育成的植株属二倍体
    C．植株D由秋水仙素加倍形成，属于纯合子
    D．D产生的配子及其比例是AA：Aa：aa=1：4：1

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    12．下列有关叙述正确的是（　　）
    A．同源染色体的形态大小不一定相同，但形状大小相同的一定是同源染色体
    B．单倍体生物的体细胞中有可能含有等位基因，但一个染色体组内不含等位基因
    C．单基因遗传病是指受一个基因控制的遗传病
    D．含有致病基因不一定患遗传病，但遗传病患者一定含有致病基因

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    19．腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵的大豆食品．下面是腐乳制作的实验流程示意图．请回答下列相关问题．

    （1）从微生物培养的角度分析，豆腐就是毛霉等微生物的培养基，按照其状态称为固体培养基．腐乳制作的原理是：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸．
    （2）传统的腐乳制作过程中，豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子；而现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染，保证产品的质量．
    （3）腐乳制作过程中，加盐的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬和抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质．
    （4）卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右．加酒的作用是可以抑制微生物的生长和能使腐乳具有独特的香味．
    （5）装瓶时，操作要迅速小心．加入卤汤后要用胶条将瓶口密封，封瓶时最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    16．倒平板时需将培养基冷却至（　　）
    A．室温B．0℃左右C．50℃左右D．100℃左右

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    科目：高中生物 来源： 题型：多选题

    3．下列各项需要消耗由呼吸作用提供的ATP的有（　　）
    A．兴奋在神经纤维上的传导B．分泌物形成中的囊泡转运
    C．光合作用的暗反应D．氧气由血浆进入组织细胞

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