Question

通过动物细胞培养的方法可以研究某种化学物质是否能够使染色体畸变，请你完成下列实验并回答有关问题．
实验原理：有毒物质能诱导染色体畸变，根据发生染色体畸变细胞的数量（或占全部培养细胞的百分数），可判断该化学物质的致畸性的强弱．
材料、药品、用具：
活的小白鼠胚胎某种化学物质、某种酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、生理盐水、灭菌设备、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜．等等．
实验步骤：
（1）制备细胞悬浮液
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入

 

酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液．
（2）进行细胞培养
①取A、B二个洁净的培养瓶，

 

．
②向A培养瓶中加入适量的该化学物质并将培养瓶摇匀；向B瓶中加入

 

．在动物细胞培养过程中，由于动物细胞在培养瓶中贴壁生长具有

 

现象，所以细胞停止分裂增殖时，培养瓶壁上形成的细胞层数是

 

．
（3）制作临时装片
①细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出二个培养瓶，再次将瓶内动物细胞处理成细胞悬浮液，加入动物细胞固定液以便迅速杀死并固定细胞．
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，

 

3～5min后，盖上盖玻片．
（4）镜检和统计
把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于

 

期的细胞，并与B组观察结果作对比．
预期结果及相应的结论（与B组相比较）
如果

 

，则说明这种化学物质致畸性很强；
如果

 

，则说明这种化学物质致畸性较弱；
如果

 

，则说明这种化学物质没有致畸性．

Answer 1

考点：动物细胞与组织培养过程

专题：

分析：实验组：经过处理的组是实验组．对照组：未经过处理的组是对照组．变量：实验过程中可以变化的因素称为变量．自变量：想研究且可人为改变的变量称为自变量．因变量：随着自变量的变化而变化的变量称为因变量．无关变量：在实验中，除了自变量外，实验过程中存在一些可变因素，能对实验结果造成影响，这些变量称为无关变量．

解答： 解：（1）把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液．
（2）①取A、B二个洁净的培养瓶，（消毒灭菌，）加入等量的细胞悬浮液．
②向A培养瓶中加入适量的该化学物质并将培养瓶摇匀；向B瓶中加入等量生理盐水．在动物细胞培养过程中，由于动物细胞在培养瓶中贴壁生长具有接触抑制现象，所以细胞停止分裂增殖时，培养瓶壁上形成的细胞层数是单层（或一层）．
（3）②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，用适宜浓度龙胆紫溶液染色3～5min后，盖上盖玻片．
（4）把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于细胞有丝分裂中期的细胞，并与B组观察结果作对比．
预期结果及相应的结论：
如果染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）很多，则说明这种化学物质致畸性很强；
如果染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）较少，则说明这种化学物质致畸性较弱；
如果染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）几乎没有，则说明这种化学物质没有致畸性．
故答案为：
（1）胰蛋白
（2）①（消毒灭菌，）加入等量的细胞悬浮液
    ②等量生理盐水 接触抑制      单层（或一层）
（3）②用适宜浓度龙胆紫溶液染色
（4）细胞有丝分裂中
预期结果及相应的结论：
染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）很多
染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）较少
染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）几乎没有

点评：本题考查探究实验，意在考查提升学生理解动物细胞培养和分析实验的能力．实验设计时要注意单一变量原则和对照原则．要注意无关变量应该相同且适宜．