Question

【题目】如图为培育转基因奶牛获得人血清白蛋白（HSA）的流程．回答下列问题：
（1）PCR扩增HSA基因使用的酶是 ， 构建含有人HSA基因表达载体时所用的工具酶有 ．
（2）图中培育转基因动物属于（填“有性”“无性”）繁殖，过程①常用的方法是 ． 在过程②进行之前，需对早期胚胎进行性别鉴定，可取胚胎细胞进行DNA分析，其采用的基因探针来自（填“常”“性”）染色体．
（3）检测牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用技术，但在转基因牛乳汁中却没有检测到HSA的存在，若从构建基因表达载体的角度分析，最可能的原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）热稳定DNA聚合酶（Taq酶、耐高温DNA聚合酶）；限制酶和DNA连接酶
（2）有性；显微注射法；性
（3）抗原﹣抗体杂交；位于目的基因前后的启动子和终止子设计不理想，导致目的基因不能进行表达
【解析】解：（1）PCR技术是在较高温度下进行的，因此需要使用热稳定DNA聚合酶；构建基因表达载体时，首先需要用限制面前切割含有目的基因的外源DNA和运载体，其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．（2）图中培育转基因动物时经过体外受精，因此属于有性繁殖；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；在过程②进行之前，需对早期胚胎进行性别鉴定，可取胚胎细胞进行DNA分析，其采用的基因探针来自性染色体．（3）检测目的基因是否表达产生相应的蛋白质可采用抗原﹣抗体杂交技术．目的基因的正常表达离不开启动子和终止子，若在转基因牛乳汁中却没有检测到HSA的存在，从构建基因表达载体的角度分析，最可能的原因是位于目的基因前后的启动子和终止子设计不理想，导致目的基因不能进行表达． 所以答案是：（1）热稳定DNA聚合酶（Taq酶、耐高温DNA聚合酶） 限制酶和DNA连接酶（2）有性 显微注射法 性（3）抗原﹣抗体杂交 位于目的基因前后的启动子和终止子设计不理想，导致目的基因不能进行表达
【考点精析】根据题目的已知条件，利用基因工程的原理及技术的相关知识可以得到问题的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术．