Question

研究发现：端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用，端粒酶是一种逆转录酶，能延长缩短的端粒（缩短的端粒其细胞复制能力受限），从而增强体外细胞的增殖能力。端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，在肿瘤中被重新激活，端粒酶可能参与恶性转化。科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性，从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。

　 方法思路：

　 ①构建干扰质粒　　　　　　　　　 （插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基（hTERT）的mRNA的干扰序列）和对照质粒PSG—CTR（插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列）。

　 ②将空质粒PSG（不含目的基因）、干扰质粒和对照质粒分别感染肝癌细胞。

　












③一段时间后观察检测细胞的　　　　　　 　　　　　　　　。计算细胞凋亡率，绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图：

　

请回答：

　 （1）完成实验步骤中的空格：

　　　 ①　　　　　　　　　　　 ；②　　　　　　　　　　　 。

　 （2）在构建质粒时，要将质粒导入大肠杆菌细胞并用　　　　　　　 培养基进行筛选鉴定，然后再提取。因此，在构建的表达载体质粒上必须含有　　　　　　　 。

　 （3）端粒酶可以通过以自身的　　　　　 为模板，　　　　　　　　　 为原料来合成端粒DNA。

（4）根据题意请分析实验结果并得出结论。

　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

Answer 1

 答案:（1）①PSG－AS  ③端粒酶活性、细胞凋亡情况、细胞生长情况

（2）选择  标记基因

（3）RNA   4种脱氧核苷酸

（4）从结果可知PSG-AS导入肝癌细胞发挥作用后，端粒酶活性降低，细胞凋亡率升高，细胞生长受抑制，说明通过DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶活性的方法，能较好抑制肿瘤细胞。

解析: （1）由曲线图或柱形图可知，①为PSG－AS，③为端粒酶活性、细胞凋亡情况、细胞生长情况。（2）基因工程用选择培养基进行筛选鉴定。（3）端粒酶是一种逆转录酶，进行逆转录。（4）从柱形图可知PSG-AS导入肝癌细胞发挥作用后，端粒酶活性降低，细胞凋亡率升高；从曲线图可知PSG-AS导入肝癌细胞发挥作用后，细胞生长受抑制。说明通过DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶活性的方法，能较好抑制肿瘤细胞。