Question

据图回答以下有关基因工程的问题．转基因抗病香蕉的培育过程如图所示．质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点．

（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶

 

，对

 

进行切割．
（2）培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有

 

，作为标记基因．
（3）香蕉组织细胞具有

 

，因此，可以利用

 

技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株．图中②表示香蕉组织细胞的

 

过程．
（4）若图中DNA的★部位出现突变，出现EcoRⅠ切割位点，你考虑最佳的限制酶选用方案什么？并请陈述你的理由．

 

，

 

．

Answer 1

考点：基因工程的应用,植物培养的条件及过程

专题：

分析：分析题图：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中SmaⅠ酶的切割位点位于抗病基因（目的基因）上；质粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位点．所以要活动重组质粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割．①表示脱分化过程、②表示再分化过程、④是新植体．

解答： 解：（1）含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，但限制酶SmaⅠ的切割位点位于抗病基因上，对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构，所以要获得抗病基因，不能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割．要获得含抗病基因的重组质粒，应选用PstⅠ、EcoRⅠ限制酶切割质粒．
（2）欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有抗卡那霉素基因，作为标记基因．
（3）利根据植物细胞具有全能性的原理，利用组织培养技术能将香蕉组织细胞培育成植株．图中①表示脱分化过程、②表示再分化过程．
（4）若图中DNA的★部位出现突变，出现EcoRⅠ切割位点，但最好还是选用PstⅠ、EcoRⅠ切割，形成不同的黏性末端，这样可以防止质粒自身环化，也可以防止目的基因和运载体反向连接．选用EcoRⅠ也可以，但容易造成质粒自行环化以及目的基因反向粘连导致重组的实际效率更低．
故答案：（1）PstⅠ、EcoRⅠ质粒和含抗病基因的DNA
（2）抗卡那霉素基因
（3）全能性     植物组织培养     再分化
（4）PstⅠ、EcoRⅠ选用EcoRⅠ也可以，但容易造成质粒自行环化以及目的基因反向粘连导致重组的实际效率更低

点评：本题结合转基因抗病香蕉的培育过程图，考查基因工程和植物组织培养技术的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点的能力；能运用所学知识与观点，对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论．