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图1为某种质粒简图,图2表示某外源DNA上的目的基因,小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRI、BamHI、Hind Ⅲ的酶切位点。下列有关叙述错误的是 

A.如果用EcoRI对外源DNA和质粒进行酶切,将多个含有目的基因的DNA片段与多个质粒的酶切产物用DNA连接酶进行连接后,两两连接所形成的产物有三种

B.如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRI酶切后,再用DNA连接酶连接,形成一个含有目的基因的重组DNA,此重组DNA中EcoRI酶切点有1个

C.为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,酶切时应使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理

D.如果要将重组DNA导入大肠杆菌细胞,则用氯化钙处理大肠杆菌可以增加其细胞壁的通透性,利于重组DNA的导入

 

【答案】

B

【解析】

试题分析:如果用EcoRI对外源DNA和质粒进行酶切,因为粘性末端相同,将多个含有目的基因的DNA片段与多个质粒的酶切产物用DNA连接酶进行连接后,两两连接所形成的产物有空质粒,反向连接的质粒,正向连接的质粒三种,故A正确。如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRI酶切后,再用DNA连接酶连接,形成一个含有目的基因的重组DNA,此重组DNA中EcoRI酶切点有2个,故B错误。为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,酶切时应使用双酶切最好,故C正确。用钙离子处理细菌细胞增强其通透性,可以提高转化效率,故D正确。

考点:本题考查基因工程相关知识,意在考察考生对知识点的理解掌握程度。

 

练习册系列答案
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科目:高中生物 来源: 题型:

下图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tetR为四环素抗性基因,P为启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、?BamHI在内的多种酶的酶切位点。?

据图回答:?

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI?酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有                                                    三种。若 要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行                。?

(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是            ;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是            。?

(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是            ,其合成的产物是            。?

(4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是           。?

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科目:高中生物 来源: 题型:

图为某种质粒表到载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tctR 为四环素抗性基因,P启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

据图回答:

(1)将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有                   

      三种 。若要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行       

(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是        

(3)在上述实验中,为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是                。

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科目:高中生物 来源: 题型:

(08海南卷)

图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tctR为四环素抗性基因,P为启动因子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有                             三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行                  

(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是                  ;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是               

(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是              ,其合成的产物是        

(4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶时                     

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科目:高中生物 来源:2012届辽宁省高二6月月考生物试卷 题型:综合题

图为某种质粒表答载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tctR 为四环素抗性基因,P为启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。据图回答:

 

(1)将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有                          三种 。若要从这些连接产物中分离出         ,需要对这些连接产物进行分离纯化。

(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是         ;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是           

(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是       ,其合成的产物是       

 (4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是               

 

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