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    （15分）纤维素酶对于能否实现乙醇工业化生产、处理服装面料等具有重要的意义，研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1，以下是该菌株的鉴定过程。

    （1）为了获得能合成纤维素酶的单菌落，可采用           法将初筛菌液接种在固体培养基上，这种培养基属于       培养基。

    （2）关于制备固体培养基的叙述，错误的是             

    A．制作固体培养基时可以加入琼脂。

    B．操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌。

    C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板。

    D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置。

    （3）实验过程中如何防止其他微生物的污染？                         。

    表5
     
    （4）下表的培养液pH均为4.8，若对MC-1中纤维素酶的活力进行测定，则不能选择表中的        的培养液。（多选）

    5）分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC-1，为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株，最可行的做法是                                。

    （6）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入________染料，培养后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。

     

    【答案】

    （1）划线法/涂布法（1分）     选择（2）B

    （3）培养基灭菌、接种过程无菌操作（接种环境灭菌，试管过火、超净工作台）

    （4）A、B、C    （5）用人工诱变（紫外线照射等）处理菌株，再进行筛选

    （6）酚红       刚果红

    【解析】

    试题分析：对于微生物分离培养通常采用平板划线法或稀释涂布平板法在固体选择培养基进行，制作固体培养基时，通常是先计算、称量、灭菌、倒平板，在培养基中通常加入琼脂作为凝固剂，等灭菌后的培养基冷却至50℃左右时进行倒平板，待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置；实验过程中防止杂菌污染的做法是培养基灭菌、接种过程无菌操作（接种环境灭菌，试管过火、超净工作台）等；MC-1中纤维素酶的活力测定，通常是要用纤维素作为碳源，不加纤维素酶、要加入适合微生物生长的营养物质，D最适合；对于微生物要获得优良品种，通过采用诱变育种的方法，然后再进行筛选出所需的菌种；检测分解尿素的微生物，在培养基中加入酚红指示剂，检测分解纤维素的微生物通常在培养基中加入刚果红染料。

    考点：考查微生物的分离与培养知识。意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能从题文提取有效信息的能力和理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题。

     

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