Question

9．如图是细胞杂交及细胞或细胞组织培养的流程图．图中a～d表示细胞或生物的结构，①～③表示过程．回答下列问题
（1）若进行植物体细胞杂交，则①过程必需用纤维素酶和果胶酶对a、b进行处理．其目的是制备原生质体（或除去细胞壁）．
（2）若是制备单克隆抗体，则a、b分别是骨髓瘤细胞和
具有免疫能力的B淋巴细胞细胞．②进行选择的目的是获得杂交瘤细胞．③代表多次的筛选过程，筛选的方法是抗原抗体反应，进行选择的目的是获得获得分泌较多抗体的细胞．
（3）若将动物细胞进行体外培养，则需要无菌、无毒，营养充足，温度适宜等环境条件，并向培养液中加入少量的CO₂其目的是调节pH．

Answer 1

分析 1、植物体细胞杂交是两个不同物种的体细胞，在一定的条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术．植物体细胞杂交技术的实质是植物原生质体的融合，这就需要使用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁获得原生质体，再应用化学法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合．
2、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体．
单克隆抗体的制备过程的细节：
（1）二次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；
②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．
（2）细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；
骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖．
（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体．
（4）提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取．

解答 解：（1）若进行植物体细胞杂交，则①过程必需用纤维素酶和果胶酶对a、b进行处理．其目的是制备原生质体（或除去细胞壁）．
（2）若是制备单克隆抗体，则a、b分别是骨髓瘤细胞和具有免疫能力的B淋巴细胞．②进行选择的目的是获得杂交瘤细胞．③为克隆化培养和抗抗体阳性检测（用抗原-抗体杂交的方法），进行选择的目的是获得分泌较多抗体的细胞．
（3）若将动物细胞进行体外培养，则需要无菌、无毒，营养充足，温度适宜等环境条件，并向培养液中加入少量的CO₂其目的是调节pH．
故答案为：
（1）纤维素酶和果胶酶   制备原生质体（或除去细胞壁）
（2）骨髓瘤细胞   具有免疫能力的B淋巴细胞    杂交瘤细胞      抗原抗体反应    获得分泌较多抗体的细胞
（3）调节pH

点评 本题考查了植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备过程，对于这两个过程的理解和应用是解题的关键．