Question

5．某科研团队利用植物细胞工程技术，把基因序列已知的抗除草剂（Bar）基因导入原生质体获得抗除草剂大豆．请回答下列相关问题：

（1）对于已获得的Bar基因可以用PCR技术进行扩增．图中的a过程通常使用相同的限制性核酸内切酶和DNA连接酶，使目的基因与载体连接形成重组DNA．
（2）在b过程中，获得原生质体除了需要纤维素酶和果胶酶，还需要用到的试剂是（较高浓度的）甘露醇．
（3）成功导入重组DNA的原生质体经脱分化形成Ⅰ愈伤组织，进而生长发育成植株．下列不属于Ⅰ细胞应具有的特征是D．
A．薄壁细胞       B．细胞质丰富           C．液泡小        D．细胞核小
（4）若要判断转基因抗除草剂大豆是否成功，比较简便的检测方法是用一定浓度的除草剂喷洒，观察转基因大豆的生长情况．

Answer 1

分析 分析题图：图中a为基因表达载体的构建过程，b为去除细胞壁获得原生质体的过程，c为将目的基因导入受体细胞的过程，d为再生新的细胞壁的过程，e为脱分化过程，f为再分化过程．

解答 解：（1）PCR技术可在体外大量扩增目的基因；图中a为基因表达载体的构建过程，该过程首先需要用限制酶切割外源DNA和运载体，其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．
（2）用酶混合液处理植物细胞时，酶混合液中含有适宜浓度的甘露醇，其作用是细胞内外的渗透压，防止细胞吸水胀破．
（3）成功导入重组DNA的原生质体经脱分化形成Ⅰ愈伤组织，进而生长发育成植株．愈伤组织的特点：高度液泡化，是由无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织（色浅）．
（4）若要判断转基因抗除草剂大豆是否成功，比较简便的检测方法是用一定浓度的除草剂喷洒，观察转基因大豆的生长情况．
故答案为：
（1）PCR    限制性核酸内切     
（2）（较高浓度的）甘露醇     
（3）愈伤组织    D
（4）用一定浓度的除草剂喷洒，观察转基因大豆的生长情况

点评 本题考查结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．