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    19．如图是我国利用基因工程方法生产人生长激素的示意图．图中的质粒是基因工程中常选用的栽体一pBR322质粒，ampR表示青霉素抗性基因，tetR表示四环素抗性基因，限制酶PstI、EcosRI和HindX切割形成的末端均不相同．据图回答下列问题：
    （1）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，③过程采用的酶是PstI酶和EcoRI酶，④过程采用的酶是DNA连接酶，它作用的化学键为磷酸二酯键．
    （2）为了提高⑤过程的成功率，常用CaCl2溶液处理大肠杆菌．作为受体的大肠杆菌细胞内，应不含青霉素抗性基因和四环素抗性基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌．
    （3）如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成的DNA片段有6种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占$\frac{1}{6}$．
    （4）按照图示的操作，将三角瓶中的大肠杆菌先接种到甲培养基上，然后分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置，一段时间后，菌落的生长状况如图所示．接种到甲培养基上的目的是筛选含四环素抗性基因的大肠杆菌．
    （5）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程不能，原因是人的皮肤细胞内存在生长激素基因，但由于基因的选择性表达，人的皮肤细胞内不能合成生长激素mRNA．

    分析 根据图示可知，含有重组质粒的大肠杆菌能在四环素培养基中生存，但不能在青霉素培养基中生存，可知切割质粒时应选用的酶是限制酶PstI，破坏了青霉素抗性基因．甲、丙培养基中含有四环素，因此能在甲和丙中生长的大肠杆菌含有四环素抗性基因，包括导入普通质粒和重组质粒的大肠杆菌；乙培养基中含有四环素和青霉素，因此能在乙中生长的是导入普通质粒的大肠杆菌．与丙相比，乙培养基中少了两个菌落，说明丙培养基中这两个菌落中的大肠杆菌成功导入了重组质粒．

    解答 解：（1）由分析可知，破坏的是青霉素抗性基因，所以用限制酶PstI，而且要保证目的基因和质粒定向连接，所以不能形成相同的黏性末端，故另一种酶选EcoRI酶，将目的基因与运载体连接需要DNA连接酶，它作用的化学键为磷酸二酯键．
    （2）将目的基因导入微生物细胞，常用CaCl2 处理，使之成为感受态细胞．由于质粒中含有青霉素抗性基因和四环素抗性基因，所以受体细胞大肠杆菌中不应含有这两种基因，以便于用筛选．
    （3）用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ进行切割，只有任意两个位点被切断且每次机会相等，任意两种酶切割会形成2个DNA片段，所以切割三次共有6个片段且这些片段不等，既得到6种．只有同时用PstI酶和FcoRI酶切割时会得到一个完整四环素抗性基因的DNA片段，故概率为$\frac{1}{6}$．
    （4）甲培养基中含有四环素，所以培养的是获得含有四环素抗性基因的大肠杆菌．
    （5）人的皮肤细胞内存在生长激素基因，但由于基因的选择性表达，人的皮肤细胞内不能合成生长激素mRNA，所以不能用人的皮肤细胞完成①过程．
    故答案为：
    （1）Pst I酶和EcoR I酶  DNA连接酶    磷酸二酯键
    （2）CaCl2    青霉素抗性基因和四环素抗性
    （3）6   $\frac{1}{6}$
    （4）含四环素抗性基因
    （5）不能     人的皮肤细胞内存在生长激素基因，但由于基因的选择性表达，人的皮肤细胞内不能合成生长激素mRNA

    点评 本题考查了基因工程和微生物培养的相关知识，考生要能够通过菌落培养的情况确定重组质粒中破坏的抗性基因，进而确定使用的限制酶，要求考生具有一定的析图能力和理解判断能力，难度适中．

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    7．如图所示果酒、果醋工厂化生产流程．请据图回答问题：

    （1）家庭自制葡萄酒所用菌种常来自于葡萄皮表面的酵母菌，图中候选菌B经筛选和纯化获取醋酸菌．
    （2）图中所用的培养基都需要在接种前用高压蒸汽灭菌法进行灭菌．
    （3）在纯化菌种A时接种了5个平板，每个平板均接种了0.1mL样品并培养．其中乙平板的菌落分布如图所示，纯化菌种A的接种方法是稀释涂布平板法，推测出现平板乙现象可能的操作失误是涂布不均匀．其余的4个平板中，菌落数分别是210、230、470、190（个），请推测样品中菌种A的数量为2100个/mL．
    （4）果酒发酵罐发酵温度控制在18℃-25℃，经过10～12天后，样液中是否产生酒精，可以用（酸性）重铬酸钾溶液来检测．
    （5）为了保持菌种的纯净，对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法进行保存．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    8．下列有关酶的叙述，正确的是（　　）
    A．一种酶只能催化一种底物的反应
    B．酶与底物结合后形状会发生变化
    C．低温能降低酶活性的原因是破坏了酶的空间结构
    D．可用碘液检测淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的专一性

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    7．报春花的花色白色（只含白色素）和黄色（含黄色锦葵色素）由两对等位基因（A和a、B和b）共同控制，两对等位基因独立遗传，控制机理如图所示．现选择AABB和aabb两个品种进行杂交，得到F1，F1自交得F2，则下列说法不正确的是（　　）
    A．F1的表现型是白色B．F2中黄色：白色=3：13
    C．黄色植株的基因型是AAbb或AabbD．F2中白色个体的基因型种类有5种

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    14．关于酶的相关实验叙述，正确的是（　　）
    A．验证酶的高效性时，自变量是催化剂的种类
    B．探究温度对酶活性的影响实验中，可选用过氧化氢酶为研究对象
    C．用淀粉、蔗糖酶和淀粉酶探究酶专一性时，不可用碘液进行鉴定
    D．在探究影响淀粉酶活性的因素时，温度、酸碱度、实验的次数等都可以作为自变量

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    4．如图为某单基因遗传病的系谱图，有关叙述正确的是（　　）

    ①若该病为常染色体显性遗传病，图中患者均为杂合子     
    ②若该病为常染色体隐性遗传病，图中正常个体为纯合子的概率不为0  
    ③若该病为伴X染色体显性遗传病，Ⅰ2为杂合子    
    ④若该病为伴X染色体隐性遗传病，Ⅱ4为杂合子．
    A．①②B．③④C．①④D．②③

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    11．某种两性花植物，花的颜色由两对等位基因（T/t，R/r）控制，基因组成与花的颜色的对应关系见表．
    基因组成T_RRT_Rr其余基因组成
    花的颜色紫色红色白色
    回答下列间题：
    （1）基因型为TtRr的植株，两对基因在染色体上的位置关系可能有三种，请参照甲图，画出另外两种类型（竖线表示染色体，圆点表示基因）．
    类型编号甲乙丙
    基因在染色体上的位置
    （2）若用测交实验来探究这两对基因在染色体上的位置关系，则应选用基因型为TtRr的植株进行测交，如果子代植株花的颜色的表现型及比例是红色：白色=1：3．说明这两对基因位于不同对同源染色体（填“同一对同源染色体”或“不同对同源染色体”）遵循基因自由组合定律．
    （3）假设这两对遵循基因自由组合定律以基因型TtRr的植株为亲本自交，F1中开白色花的植株基因型有5种，F1中所有开紫色花的植株再自交，则F2中开白色花的植株所占的比例为$\frac{1}{6}$．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    8．发热是人体抵抗疾病的生理性防御反应，体温升高可刺激人体的免疫系统产生各种免疫活性物质，抑制病原体的增殖．分析回答：
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    （2）SARS冠状病毒侵入人体后刺激机体产生强烈免疫反应，通过复杂调节过程使机体甲状腺激素分泌增加，代谢增强，产热量＞（＜、=、＞）散热量，导致体温升高，SARS感染者体温大多达39-40℃度，并可持续1-2周以上，表现为非典型肺炎．对感染SARS冠状病毒的重症急性呼吸综合征患者可以注射较大剂量的糖皮质激素，以抑制其体温升高．

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    科目：高中生物 来源：2015-2016浙江温州市十校联合体高二下期中联考生物卷（解析版） 题型：选择题

    下图是反射弧结构模式图，a、b分别是神经纤维上的刺激位点，甲、乙是分别置于神经纤维B、D上的电位计，可记录神经纤维上的电位变化；A为骨骼肌，C为反射中枢。下列说法正确的是

    A．刺激b点，会引起A的收缩，但E不会发生反应

    B．刺激a点会引起A的收缩，属于反射活动

    C．刺激b点，只有乙电位计可记录到电位变化

    D．刺激a点，乙不能记录到电位变化，表明反射弧的某部位受损

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