[题目][加试题]为了研究接种量对酵母菌种群数量的影响.请根据以下提供的实验材料.以酵母菌活细胞数及细胞总数(活细胞数和死细胞数之和)为检测指标.完善实验思路.预测实验结果并进行分析与讨论.材料与用具:培养瓶.酵母菌液.美蓝染料(氧化型为蓝色.还原型为无色,使用的美蓝为氧化型.且能进入细胞).液体培养基.高压蒸汽灭菌锅.移液器.摇� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】【加试题】为了研究接种量对酵母菌种群数量的影响。请根据以下提供的实验材料，以酵母菌活细胞数及细胞总数（活细胞数和死细胞数之和）为检测指标，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。

材料与用具：培养瓶、酵母菌液、美蓝染料（氧化型为蓝色，还原型为无色；使用的美蓝为氧化型，且能进入细胞）、液体培养基、高压蒸汽灭菌锅、移液器、摇床、血细胞计数板、吸管、显微镜等。

（要求与说明：定时取样，培养足够时间；细胞计数的具体操作过程不作要求；培养过程中不更换培养液；实验条件适宜）

请回答：

（1）完善实验思路：

①对液体培养基用___________________进行灭菌后，然后均分到3组培养瓶中。用移液器吸取____________________的酵母菌液，分别接种入3组培养瓶。

②从各组培养瓶各吸取0.1mL酵母菌培养液，___________________，室温染色适宜时间。立即在显微镜下用血细胞计数板计数__________细胞和__________细胞，统计细胞总数，并记录。

③将3组培养瓶放在摇床上恒温培养。

……

__________

（2）预期实验结果（设计一个坐标系，并绘制不同接种量下酵母菌活细胞数的变化曲线）：_____________。

（3）分析与讨论：

①美蓝染色后活的酵母细胞从蓝色变为无色的原因是_____________。

②在整个实验过程中，直接从静置的培养瓶中取培养原液计数的做法是错误的，请纠正错误______________________________________________________。

【答案】高压蒸汽灭菌锅 3种不同接种量加入美蓝染料适量，摇匀无色酵母活蓝色酵母死 ④每隔相同时间重复②。⑤统计分析实验所得数据。（1分）

活酵母菌细胞呼吸产生还原态氢，能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型摇匀培养液后再取样，培养后期的样液稀释后再计数

【解析】试题分析：本实验目的是研究接种量对酵母菌种群数量的影响，自变量是培养时间，因变量是酵母菌活细胞数及细胞总数。结合所给材料和用具以及具体要求，完善实验思路：

（1）①用高压蒸汽灭菌锅对液体培养基进行灭菌后，然后均分到3组培养瓶中。用移液器吸取3种不同接种量的酵母菌液，分别接种入3组培养瓶。

②从各组培养瓶各吸取0.1mL酵母菌培养液，加入美蓝染料适量，摇匀，室温染色适宜时间。立即在显微镜下用血细胞计数板计数无色酵母活细胞和蓝色酵母死细胞，统计细胞总数，并记录。

③将3组培养瓶放在摇床上恒温培养。

④每隔相同时间重复②步骤。

⑤统计分析实验所得数据。

（2）设计一个坐标系并绘制不同接种量下酵母菌活细胞数的变化曲线时应注意：①横纵坐标的含义和单位；②必须绘制出三条曲线（代表不同接种量）且每条曲线要绘制出大致的变化趋势；③要对三条曲线作出明确的示例标注。

（3）①实验中美蓝染色后活的酵母细胞从蓝色变为无色的原因是活酵母菌细胞呼吸产生还原态氢，能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型。

②若在实验过程中直接从静置的培养瓶中取培养原液计数，会导致培养液中酵母菌分布不均匀，使计数结果不准确，正确的做法是摇匀培养液后再取样，培养后期的样液稀释后再计数。

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（1）CA65转基因小鼠载体的构建：将CA65基因用______________酶切后，插入到角蛋白基因中，构建CA65转基因载体。

（2）CA65转基因小鼠的获得与检测：用____________法将转基因载体注射到小鼠的__________中，体外培养获得早期胚胎再__________到代孕母鼠子宫角或____________中。小鼠出生10天后提取其DNA，用__________技术扩增CA65基因来检测CA65转基因小鼠。