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    胚胎干细胞（ES细胞）在生物学研究中具有十分重要的应用价值。

    （1）上图为某科研小组采用“基因靶向”技术先将小鼠的棕褐毛色基因导入黑色纯种小鼠的ES细胞中，再将改造后的ES细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程。在目的基因获取和基因表达载体构建过程中使用的工具酶有 。

    （2）上图中完成第Ⅱ步操作得到由两个DNA切段连接成的产物有 种重组DNA分子；第Ⅲ步操作后，还需经过 的过程，才能将该ES细胞注射到囊胚中。

    （3）ES细胞在功能上具有 的特点；目前研究人员正尝试通过科技手段利用ES细胞经过特殊诱导，为因故失去手的患者提供新的“手”，该过程揭示了细胞 的机理。

    （4）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断，一般情况下，细胞中有D或S途径即能分裂增殖。人淋巴细胞中虽然有这两种DNA合成途径，但一般不分裂增殖。鼠ES细胞中只有D途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加 促融，获得杂种细胞。若要从培养液中分离出杂种细胞，写出实验方法（不考虑机械方法），并说明理由。

    方法：___________________________________________________________。

    理由：___________________________________________________________。

    （1）DNA连接酶和限制性核酸内切酶（错一处不得分）

    （2）3 筛选含小鼠目的基因的胚胎干细胞

    （3）发育的全能性 分化和凋亡

    （4）聚乙二醇

    方法：在上述试管中加入氨基嘌呤后，收集能分裂增殖的细胞（2分）

    理由：淋巴细胞不能分裂，鼠ES细胞的D途径被阻断，也不能分裂，而杂种细胞中有S途径，可分裂增殖

    【解析】

    试题分析：（1）在目的基因获取和基因表达载体构建过程中使用的工具酶有DNA连接酶和限制性核酸内切酶。

    （2）上图中第Ⅱ步操作是构建基因表达载体的过程，该过程中可由两个DNA切段连接成的产物有载体—目的基因，载体—载体，目的基因—目的基因3种重组DNA分子；第Ⅲ步操作是将目的基因导入受体细胞的过程，之后还需经过筛选含小鼠目的基因的胚胎干细胞的过程，才能将该ES细胞注射到囊胚中。

    （3）ES细胞在功能上具有发育的全能性的特点；利用ES细胞经过特殊诱导，使其分化发育成“手”的过程中，要经历细胞分化和凋亡的生理过程。

    （4）聚乙二醇或灭活的病毒可以促进动物细胞融合，获得杂种细胞；根据题意可知，在含氨基嘌呤的培养基中，淋巴细胞不能分裂，鼠ES细胞的D途径被阻断，也不能分裂，而杂种细胞中有S途径，可不断分裂增殖，因此可以在上述试管中加入氨基嘌呤后，收集能分裂增殖的细胞，以达到从培养液中分离出杂种细胞的目的。

    考点：本题考查动物细胞工程的相关知识，意在考查考生运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    将全部DNA分子双链经32P标记的雄性动物细胞(染色体数为2N)置于不含32P的培养基中培养。经过连续两次细胞分裂后产生4个子细胞，检测子细胞中的情况。下列推断正确的是

    A．若进行有丝分裂，则含32P染色体的子细胞比例一定为1/2

    B．若进行减数分裂，则含32P染色体的子细胞比例一定为1

    C．若子细胞中的染色体都含32P，则一定进行有丝分裂

    D．若子细胞中的染色体不都含32P，则一定进行减数分裂

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    ①根据图１分析，该群落发展至第３阶段时，甲、乙、丙之间为 关系。在该演替过程中，生态系统的 稳定性会逐渐提高。

    ②根据图２中数据可知，阳坡群落物种中竞争最激烈的是 。

    （2）有一种鞭毛藻能感受光线的强弱，借助鞭毛移动到光线合适的位置进行光合作用，这说明 离不开信息的作用。

    （3）下图ａ是某段时间内沼气池中产甲烷杆菌的种群增长率曲线，请在下图ｂ中画出这段

    时间的种群数量变化曲线。

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    C．绿色番茄果实中的营养物质主要来自果实细胞的叶绿体

    D．与红色果实相比，处于绿果期的番茄果实光合作用更强

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    （1）由图甲可推知，与P点相比，Q点限制单株光合作用强度的外界因素是______________（写出两种）。

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    （3）将对称叶片左侧遮光右侧曝光（如图丙），并采用适当的方法阻止两部分之间的物质和能量的转移。在适宜光照下照射12小时后，从两侧截取同等面积的叶片，烘干称重，分别记为a和b（单位：g），则b－a所表示的是______________。

    （4）装置丁（如图）可用来探究光照强度对光合作用强度的影响。根据该图的材料及设置，可以确定该实验的自变量应该是_______________。

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    下列有关生态系统信息传递的叙述，错误的是

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    C.生态系统中信息都是由生物发出并且相互传递而发挥其作用的

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    （2）某同学提出了如下图所示的解决秸秆问题的方案：

    从生态系统能量流动的实践意义角度分析该方案实现了 ；从环境保护角度分析具有 意义。

    （3）若将大量培养的纤维素分解菌与粉碎的秸秆搅拌混匀后施到土壤中，可以增加秸秆降解速度，从土壤中筛选分离出纤维素分解菌最好选择 土壤取样，无菌条件下加入含选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在 上，一定温度下培养1~2d，直至培养变浑浊，为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入 染液，将筛选获得的菌液稀释后用 方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生 的菌落作为菌种进行扩大培养。

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