[题目]铁皮石斛位居中华九大“仙草之首.其富含多糖成分.研究表明铁皮石斛多糖对细胞增殖有一定的促进作用.OD值能反映细胞增殖水平.为研究其不同浓度.不同处理时间的促进效果.请根据以下实验材料.提出并完善实验思路.对实验结果进行处理.材料与用具:400 hg/mL的铁皮石斛多糖溶液.生理盐水.小鼠胚胎干细胞(mES).细胞培养液.5%二氧� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】铁皮石斛位居中华九大“仙草”之首，其富含多糖成分。研究表明铁皮石斛多糖对细胞增殖有一定的促进作用，OD值能反映细胞增殖水平。为研究其不同浓度、不同处理时间的促进效果。请根据以下实验材料，提出并完善实验思路，对实验结果进行处理。

材料与用具：400 hg/mL的铁皮石斛多糖溶液、生理盐水、小鼠胚胎干细胞（mES）、细胞培养液、5%二氧化碳培养箱、96孔细胞培养板、移液器、0.05%胰蛋白酶等

（说明：不考虑加入多糖对体积的影响；96孔细胞培养板的孔内可进行细胞培养，图中大写字母表示组别； 3天内每隔24小时计数一次，OD值的具体测法不作要求，实验条件适宜）

（1）实验思路：(实验分组用表格形式表示）

①____________________________________。

②____________________________________。

③____________________________________。同时设置G组为不加mES的空白对照组。

④____________________________________。

⑤____________________________________。

（2）实验证明，铁皮石斛多糖浓度在50%/mL200μg/mL时，处理24h、48h、72h均对mES的增殖有促进效果，处理时间与效果呈正相关，且浓度为100μg/mL时达到最高点。请用曲线图在一个坐标系中表示该实验结果。

【答案】利用浓度为400μg/mL的铁皮石斛多糖溶液和生理盐水配制25μg/mL、50μg/mL、1OO μg/mL、200μg/mL的铁皮石斛多糖溶液按上述分组，用移液器取等量的小鼠胚胎干细胞和细胞培养液加到96孔细胞培养板的A—F组中培养，每个浓度做4个重复。同时G组设置为不加mES的空白对照组将96孔细胞培养板置于37℃、5%C02培养箱中培养每24 h取对应组细胞用0.05%胰蛋白酶处理，测定每组细胞的OD值，并记录分析统计实验数据

【解析】本题考查实验设计，细胞增殖相关知识，意在考察考生对知识点的理解和应用能力。

（1）本课题研究的是铁皮石斛多糖在不同浓度、不同处理时间对细胞增殖的促进效果，所以实验的自变量是不同浓度的铁皮石斛多糖和不同的处理时间，因变量是细胞的OD值。根据所给实验结果铁皮石斛多糖浓度在50%/mL200μg/mL时，处理24h、48h、72h，所以应配制铁皮石斛多糖浓度在50%/mL200μg/mL时，处理24h、48h、72h。

而所给的实验材料是400μg/mL的铁皮石斛多糖溶液，所以实验步骤应首先利用浓度为400μg/mL的铁皮石斛多糖溶液和生理盐水配制25μg/mL、50μg/mL、1OO μg/mL、200μg/mL的铁皮石斛多糖溶液。然后进行分组并培养不同的时间即表格所述：

为按上述分组，用移液器取等量的小鼠胚胎干细胞和细胞培养液加到96孔细胞培养板的A—F组中培养，每个浓度做4个重复。同时G组设置为不加mES的空白对照组。将其放在相同且适宜的条件下培养，即将96孔细胞培养板置于37℃、5%C02培养箱中培养，每24 h取对应组细胞用0.05%胰蛋白酶处理，测定每组细胞的OD值，并记录分析统计实验数据。

（2）根据实验结果，以浓度为横坐标，以OD值为纵坐标，然后做出不同时间的图像，要表示出处理时间与效果呈正相关，且浓度为100μg/mL时达到最高点，即

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