Question

回答下列有关微生物培养的问题．
（1）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．
①该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量．在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是

 

；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为

 

．实验中的接种工具称为

 

．
②该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过

 

灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是

 

．
（2）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表：“+”表示有，“-”表示无）．
（注：在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成红色复合物．）

	酵母膏	无机盐	淀粉	纤维素粉	琼脂	CR溶液	水
培养基甲	+	+	+	+	-	+	+
培养基乙	+	+	+	-	+	+	+

据表判断，培养基甲

 

（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是

 

；培养基乙

 

（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是

 

．

Answer 1

考点：土壤中能分解纤维素的微生物及其应用价值,微生物的分离和培养

专题：

分析：1、微生物实验室培养过程中的无菌技术包括消毒和灭菌．
2、计算样品菌液中的菌株数时，每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表样品菌液的稀释倍数．
3、分析表格可知，培养基甲为液体培养基，不能用于分离和鉴别纤维素分解菌；纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基，而培养基乙没有纤维素，因此也不能用于分离和鉴别纤维素分解菌．

解答： 解：（1）①微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格；由题意知，平板上生长的平均菌落数=（39+38+37）÷3=38个，则1ml水样中的菌落数=（C÷V）×M=（38÷0.1）×100=3.8×10⁴个，每升水样中的活菌数为3.8×10⁴×10³=3.8×10⁷个；实验中的接种工具称为无菌玻璃刮铲（也叫涂布器）．
②该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时的接种环要通过灼烧灭菌；平板划线法分离菌株时，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．
（2）由以上分析知，培养基甲为液体培养基，液体培养基不能分离单菌落，所以培养基甲不能用于分离和鉴别纤维素分解菌；用于纤维素分解菌鉴别的培养基属于固体培养基，而培养基乙没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌，因此培养基乙也不能用于分离和鉴别纤维素分解菌．
故答案为：
（1）①检测培养基平板灭菌是否合格       3.8×10⁷    无菌玻璃刮铲（涂布器）    灼烧     ②将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
（2）不能    液体培养基不能分离单菌落     不能     乙培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌

点评：本题考查微生物培养中的无菌技术、微生物的分离和计数、培养基的分类和作用的知识，对相关知识点的识记和理解是解题的关键．