Question

16．回答下列有关微生物和进化的问题
莠去津是一种除草剂，它是一种在土壤中不易被降解的含氮的有机化合物．由于莠去津在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，某课题小组A的同学按下面程序选育能降解的细菌（目的菌）．

（1）除草剂对土壤微生物具有选择作用，使长期使用除草剂的土壤中可能含有密度较高的目的菌．从图1中可判断目的菌的异化作用类型是需氧型．
（2）配制图示无氮固体培养基时，在各成分都溶化后分装前，要进行的是调pH和灭菌．对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸气灭菌法．如图1示利用稀释涂布平板法将微生物接种在固体培养基上，其目的是把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，通过培养获得由4个目的菌繁殖形成的菌落．
另一个课题小组B对以上过程提出异议，认为A组实验过程有疏漏、不够严密．
（3）若按照A组的实验过程，最终得到菌落除了能降解莠去津的细菌以外，可能还有另外一类自生固氮菌．
（4）B组查阅资料，发现含过量莠去津的培养基不透明，他们在A组的基础之上，将菌夜涂布在含过量莠去津且无其他氮源的培养基上，实验结果如图2．在此固体培养基中，无透明带菌落利用的氮源主要是氮气；有透明带菌落利用的氮源主要是莠去津，据此可筛选出目的菌．

Answer 1

分析 从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．选择培养基制作完成后应该先调PH后灭菌．微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐．

解答 解：（1）除草剂对土壤微生物具有选择作用，使长期使用除草剂的土壤中可能含有密度较高的目的菌．从图1中可判断目的菌的异化作用类型是需氧型．
（2）配制图示无氮固体培养基时，在各成分都溶化后分装前，要进行的是调PH和灭菌．对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸气灭菌法．图1为利用稀释涂布平板法将微生物接种在固体培养基上，其目的是把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，通过培养获得由4个目的菌繁殖形成的菌落．
（3）培养基是无氮培养基，自生固氮菌能利用空气中的氮来自己提供生长所需氮源，而其他细菌不可以，没有外来氮源，其他细菌会死亡，而自生固氮菌不会．
（4）莠去津是一种在土壤中不易被降解的含氮的有机化合物，含过量莠去津的培养基不透明．在含过量莠去津的无氮培养基上，无透明菌落说明此菌落不利用莠去津中的氮，利用培养基以外氮源．透明菌落说明培养基中的莠去津被降解了，因为含过量莠去津的培养基不透明，故菌落是目的菌菌落．
故答案为：
（1）选择    需氧型
（2）调PH    高压蒸气灭菌法   稀释涂布平板    4
（3）自生固氮
（4）氮气 莠去津

点评 本题的知识点是微生物培养，筛选微生物的方法、微生物的数目的测定等方法，主要考查学生运用微生物的培养技术解决生活中问题的能力和对微生物，是实验室培养技术的综合应用能力．