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    【题目】家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。

    （1）进行转基因操作前，需用_____________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。

    （2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的__________________和____________________之间。

    （3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。PCR技术利用的原理是_______，该PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核苷酸、模板DNA、_______和__________。

    （4）生物反应器培养家蚕细胞时会产生接触抑制，所以培养时通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

    【答案】胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） 启动子 终止子 DNA分子的复制 Taq酶（耐高温的DNA聚合酶） （干扰素基因特异性的DNA）引物对 （两种引物） 增大细胞贴壁生长的附着面积

    【解析】

    （1）进行转基因操作前，为了使幼蚕组织分散为单个细胞，通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。

    （2）启动子位于目的基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA；终止子位于基因的尾端，终止转录。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间。

    （3）PCR技术利用的原理是DNA分子复制的原理。PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA 、Taq酶（耐高温的DNA聚合酶）和两种引物。

    （4）细胞离体培养时通常表现出：贴壁生长和接触抑制，多孔的中空薄壁小玻璃珠能增大细胞贴壁生长的附着面积，增加培养的细胞数量。

    练习册系列答案
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    组分

    含量

    KH2PO4

    1．4g

    Na2HPO4

    2．1g

    MgSO4·7H2O

    0．2g

    葡萄糖

    10．0g

    尿素

    1．0g

    琼脂

    15．0g

    水

    定容至 1000mL

    A.从物理性质上看它是固体培养基

    B.从功能上看它是一种选择培养基

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    D.它是利用营养物质缺陷原理设计的

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    B.鉴定脂肪和观察植物细胞的有丝分裂都需要用到酒精

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    D.用新配制的NaOH和CuSO4混合液，可检测待测样液中是否含有蛋白质

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    （1）该小鼠膀胱生物反应器的目的基因是__________ 。

    （2）将目的基因导入小鼠细胞时，通常用__________作为受体细胞，采用最多的导入方法是________。

    （3）在该膀胱生物反应器中，应使目的基因在小鼠的__________细胞中特异表达。

    （4）从小鼠的尿液中提取的人的生长激素，既可以用________（方法） 来检测，也可以与人体自身合成的生长激素的功能进行__________比较，以确定其是否与天然产品相同。

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    （1）请

    ①该探究实验的设计严密吗？为什么？___________________________________。

    ②如果你认为不严密，请作出补充。

    再次分别用红色和绿色荧光物质标记人和鼠细胞膜上的蛋白质，并分成两组，然后___________，观察并记录____________________的时间。

    （2）本实验除通过经相同时间后观察红色和绿色荧光物质在细胞膜上的分布情况来判断温度对膜流动性的影响外，还可以通过哪种方式来比较说明这种影响？__________________。

    （3）实验预测及相应结论（在你纠正的基础上进行）_______

    实验预测内容项目

    (一)

    (二)

    (三)

    40 ℃条件下荧光物质分布均匀所用时间

    ①______40 min

    大于40 min

    ④______40 min

    10 ℃条件下荧光物质分布均匀所用时间

    ②______40 min

    小于40 min

    ⑤______40 min

    相应结论

    升高温度，细胞膜流动性③______

    升高温度，细胞膜流动性减慢减弱

    温度变化对细胞膜的流动性⑥______

    注：①②④⑤中填写大于、小于或等于。

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