Question

7．请回答有关物质提取、分离以及微生物培养方面的问题：
（1）实验室分离叶绿体的色素常用的方法是纸层析法；提取胡萝卜素常用的方法是萃取法；植物芳香油主要通过水蒸气蒸馏法获得．
（2）在DNA的粗提取与鉴定实验中，提取较纯净的DNA利用了DNA不溶于酒精的特点；鉴定DNA可利用二苯胺试剂．
（3）从土壤中分离出尿素分解菌，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的氮源，培养基中加入指示剂酚红，培养后若变红则鉴定其中含有所需细菌．
（4）纯化菌种和统计某活菌的数目，宜采用的接种方法是稀释涂布平板法，这种依菌落数统计出的活菌常常出现观察值比实际值低，其原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到只是一个菌落．

Answer 1

分析 1、水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法，方法有：水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏．用萃取法提取胡萝卜素的原理是植物芳香油易溶于有机溶剂，芳香油溶解于有机溶剂后，只需蒸发出有机溶剂，就可获得纯净的植物芳香油．
2、DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；①DNA不容易酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色．
3、从土壤中分离尿素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．尿素分解菌产生的脲酶能够将以尿素为唯一氮源的培养基中的尿素分解为氨，使pH升高，培养基中加入酚红指示剂后呈红色．
4、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法．

解答 解：（1）用纸层析法分离叶绿体的色素，用萃取法提取胡萝卜素，水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法．
（2）在DNA的粗提取与鉴定实验中，提取较纯净的DNA利用了DNA不溶于酒精的特点；鉴定DNA可利用二苯胺试剂．
（3）从土壤中分离出尿素分解菌，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的氮源，培养基中加入指示剂酚红，培养后若变红则鉴定其中含有所需细菌．
（4）纯化菌种和统计某活菌的数目，宜采用的接种方法是稀释涂布平板法．该方法统计的菌落数比活菌的数目偏低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到只是一个菌落．
故答案为：
（1）纸层析法   萃取法     水蒸气蒸馏
（2）不溶于酒精     二苯胺
（3）酚红
（4）稀释涂布平板法     当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到只是一个菌落

点评 本题考查了从生物材料中提取某些成分、DNA的粗提取与鉴定、微生物的分离和培养等相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查．