【题目】为研究野生型拟南芥抗盐机理，研究人员利用T-DNA插入拟南芥基因组中，得突变体Y。
（1）种植野生型拟南芥，将地上部分浸入______菌悬浮液中以实现转化，该菌的T-DNA上需带有抗除草剂基因以便筛选。在适宜条件下培养，收获种子（称为T1代）。
（2）假设所处理植株为T-DNA单拷贝插入，则T1代植株自交后所结种子中具有抗除草剂性状的占______。继续种植具有抗除草剂性状的种子，长成植株后进行自交，若______，表明获得了纯合的转基因突变体植株Y。
（3）野生型拟南芥的抗盐性状与D基因密切相关，T-DNA插入到D基因中，致使该基因失活，失活后的基因记为d。收集上述突变体Y叶片并提取DNA，分别用引物“LB+RP”组合及“LP+RP”组合进行PCR扩增。已知插入完整T-DNA后，“LP+RP”不能完成PCR扩增如图．检测扩增结果中，若______，则相应植株的基因型为Dd；若______，则相应植株的基因型为dd。
（4）研究人员收集7个突变体的叶片，提取叶片总mRNA，并逆转录为cDNA，利用特异性引物进行PCR扩增，结果如图．基因actin在拟南芥中表达相对稳定，作为本实验的______，结果表明______号植株因T-DNA的插入，D基因完全沉默。
（5）将野生型和突变体种子消毒后，分别播种于含有不同浓度NaCl培养基中，观察种子萌发情况，结果见如图．
由如图可知，在不含NaCl的培养基上，野生型和突变体种子的萌发率______；随着NaCl浓度的升高，突变体种子的萌发率明显______。
（6）野生型在高浓度NaCl胁迫下，脱落酸（ABA）含量增加，并迅速参与到抗胁迫的反应中。突变体D基因由于T-DNA的插入不能正常表达，导致突变体的抗盐性下降，由此推测D基因抗盐作用的机理是______。
【答案】农杆 3/4 全部具有抗除草剂性状 “LB+RP”组合和“LP+RP”组合均能进行PCR扩增 “LB+RP”组合能扩增，“LP+RP”组合不能扩增 参照或标准 5 没有明显差异 下降 D基因的表达会促进ABA的合成，从而提高抗盐能力
【解析】
基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
（1）研究人员利用T-DNA插入拟南芥基因组中，T-DNA是农杆菌质粒的组成，所以种植野生型拟南芥，将地上部分浸入农杆菌悬浮液中以实现转化，该菌的T-DNA上需带有抗除草剂基因以便筛选。在适宜条件下培养，收获种子。
（2）假设所处理植株为T-DNA单拷贝插入，则T1代植株基因型为杂合子，自交后所结种子中具有抗除草剂性状的占3/4，继续种植具有抗除草剂性状的种子，长成植株后进行自交，若全部具有抗除草剂性状或没有性状分离，表明获得了纯合的转基因突变体植株Y。
（3）已知T-DNA插入到D基因中，致使该基因失活，失活后的基因记为d，由图示引物的位置可知，若检测扩增结果中，若“LB+RP”组合和“LP+RP”组合均能进行PCR扩增，则相应植株的基因型为Dd；若“LB+RP”组合能扩增，“LP+RP”组合不能扩增，则相应植株的基因型为dd。
（4）基因actin在拟南芥中表达相对稳定，作为本实验的参照或标准，结果表明5号植株因T-DNA的插入，使其没有表达出D基因的产物，即D基因完全沉默。
（5）由图3可知，在不含NaCl的培养基上，野生型和突变体种子的萌发率没有明显差异；随着NaCl浓度的升高，突变体种子的萌发率明显下降。
（6）野生型在高浓度NaCl胁迫下，脱落酸（ABA）含量增加，并迅速参与到抗胁迫的反应中。突变体D基因由于T-DNA的插入不能正常表达，导致突变体的抗盐性下降，由此推测D基因抗盐作用的机理是D基因的表达会促进ABA的合成，从而提高抗盐能力。
天天向上一本好卷系列答案
小学生10分钟应用题系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】下列有关真核细胞的结构叙述，不正确的是
A. 功能越复杂的细胞膜，蛋白质的种类和数量越多
B. 细胞膜作为系统的边界，维持细胞内环境的稳定
C. 生物膜是对生物体内所有膜结构的统称
D. 细胞核是遗传物质储存和复制的场所
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【题目】下图是某学生绘出的细胞分裂模式图像，请分析回答下列问题：
（1）该图表示____________（填“动物”或“植物”）细胞有丝分裂过程，细胞周期排序是（填字母）____________。
（2）在____________期，细胞完成DNA的复制和有关蛋白质的合成。
（3）下列哪种实验材料适合观察细胞的有丝分裂（______）
A．蚕豆叶肉细胞 B．人的口腔上皮细胞
C．蚕豆根尖分生区细胞 D．蛙的红细胞
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【题目】下图为人体内某些生理过程示意图解。以下叙述不正确的是（ ）
A. 人在饥饿（餐后4－5小时）时，4过程将会加强
B. 胰岛A细胞分泌的激素可以促进4过程
C. 若下丘脑分泌并释放的抗利尿激素增多，则C液将会减少
D. 若某人的胰岛B细胞受损，则此人可能会出现C液增多并含有葡萄糖的现象
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】某生物细胞周期中的三个阶段（用①、②、③表示）示意图如下，每个阶段内绘有相应的流式细胞仪分析图谱，据图分析判断下列错误的是（ ）
A. 一个细胞周期可表示为①→②→③过程B. DNA复制发生在①阶段且易发生基因突变
C. 着丝点分裂和染色体加倍发生在②阶段D. ③阶段的细胞可能是刚刚完成分裂的细胞
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】如下图是高致病性禽流感病毒H5N1侵入人体后发生免疫反应的图解，图中A、B为有关的物质。各种分析正确的是
A. 禽流感病毒H5N1侵入人体后，T细胞细胞周期变短
B. 效应T细胞与靶细胞密切接触依赖B物质，B物质的化学本质是脂质
C. T细胞成熟于骨髓，它在人体免疫应答中具有识别、呈递抗原及增殖分化的功能
D. A物质为抗体，最终将禽流感病毒H5N1清除
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】图1表示某绿色植物叶肉细胞，其中a～d代表生理过程，①～④代表物质。图2表示光合作用过程中产生过剩[H](NADPH)转运至细胞质基质的过程。据图回答下列问题：
(1)图1中，过程a进行的场所是________，产生ATP的生理过程有____________(用图中字母表示)。
(2)图1中，物质③是________，液泡中的①参与过程d至少要穿过________层磷脂分子层。
(3)据图2推测磷酸甘油酸属于________化合物，叶绿体中磷酸二羟丙酮的主要作用是____________________。
(4)在适宜温度下用图3装置测定植物的实际光合速率。在适宜光照条件下有色液滴右移，距离为m；黑暗条件下有色液滴左移，距离为n，则该植物的实际光合速率可表示为________。有同学认为，以上测量结果仍有误差，排除装置气密性、气压等因素外，还可能的原因有________________________。
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