Question

【题目】[生物——生物技术实践]土壤中的细菌数量多、分布广，包括自养细菌和异养细菌。自养细菌能直接利用光能或无机物氧化时所释放的化学能同化CO2合成有机物（例如硝化细菌），异养细菌从有机物中获得能源和碳源（例如纤维素分解菌），人类根据需要从土壤中分离提纯各种细菌。回答下列相关问题：

（1）培养细菌的培养基除了含有碳源外，还必须含有的基本成分是___________。

（2）对培养基灭菌的方法是___________。

（3）若要筛选硝化细菌，培养基中不应该加入___________，从功能上分，该培养基属于___________培养基。

（4）若要鉴别所分离的细菌是否为纤维素分解菌，则应该在培养基中加入___________，观察培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡，其主要目的是___________。

（5）纯化菌种时，为了得到单菌落，常用的接种方法是___________和___________。

（6）细菌计数，根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出的数目往往比实际数目低，原因是___________。

Answer 1

【答案】 氮源、水、无机盐、维生素 高压蒸汽灭菌或高温高压灭菌 碳源 选择 刚果红 供氧 稀释涂布平板法 平板划线法 两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

【解析】（1）培养细菌的培养基必须含有的基本成分是碳源、氮源、水、无机盐、维生素。

（2）对培养基灭菌的方法是高压蒸汽灭菌或高温高压灭菌。

（3）硝化细菌是自养型生物，可直接利用空气中的CO2作为碳源，所以要筛选硝化细菌，培养基中不应该加入碳源。从功能上分，该培养基属于选择培养基。

（4）利用刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应的原理。鉴别所分离的细菌是否为纤维素分解菌，可以在培养基中加入刚果红，观察培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。对优良菌株进行液体扩大培养需要振荡，其主要目的是增加溶氧量，为菌种供氧。

（5）纯化菌种时，为了得到单菌落，常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。

（6）根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出的细菌数目往往比实际数目低的原因是两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。