【题目】图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:
(1)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,其三段产物长度为_________________。
(2)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有__________种不同DNA片段。为了提高实验成功率,需要通过__________技术扩增目的基因,以获得大量的目的基因。
(3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是__________。在导入重组质粒后,为了筛选出含质粒的大肠杆菌,一般先用添加抗生素B的培养基进行培养,然后将生长的菌接种到只含__________的培养基中培养,可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。
(4)假设用BamHⅠ切割DNA获取目的基因,用MboⅠ切割质粒,然后形成重组质粒,若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,能否用BamHⅠ?__________。为什么?____________________。
【答案】537bp、790bp、661bp 2 PCR BamHⅠ 抗生素A 不一定 因为目的基因和抗生素B抗性基因拼接处不一定出现GGATCC
【解析】
本题主要考察DNA重组技术的步骤,要求考生能准确把握限制酶的作用特点、标记基因的作用及重组质粒的筛选等知识点,并能从题图中提取有效信息,综合运用。
(1)限制酶SmaI的酶切割位点为CCC↓GGG,目的基因D的序列里面有两个该酶的酶切位点,故此段DNA会被切割成三段,从左至右第一段为534+3=537bp;第二段796-3-3=790bp;第三段658+3=661bp;
(2)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,基因D就突变为基因d,则基因d上只有一个限制酶SmaⅠ切割位点,被限制酶SmaⅠ切割的产物长度为534+796-3=1327kb、658+3=661bp,故隐性纯合子被限制酶SmaⅠ切割的产物中共有2种不同DNA片段。为了提高试验成功率,需要通过PCR技术扩增目的基因,以获得大量的目的基因。
(3)由图1可知目的基因两侧都有GGATCC序列,该序列可被限制酶BamHⅠ和MboⅠ的识别并切割;由图2质粒上的GGATCC序列可知,若选用MboⅠ切割,会将质粒中两个抗性基因(标记基因A、B)都破坏掉,故只能选用BamHⅠ(破坏抗生素A抗性基因,不破坏抗生素B抗性基因)。首先用含有抗生素B的培养基培养大肠杆菌,能生存下来的是含有普通质粒和重组质粒的大肠杆菌;再将培养的大肠杆菌接种在含有抗生素A的培养基培养,能生存下来的是含有普通质粒的大肠杆菌,通过对比分析即可得到含重组质粒的大肠杆菌。
(4)若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,不一定能用BamHⅠ,因为BamHⅠ的识别序列为GGATCC,而目的基因和抗生素B抗性基因拼接处不一定出现GGATCC。
科目:高中生物 来源: 题型:
【题目】如图为研究NaHCO3溶液浓度对光合作用速率的影响的实验。下列说法错误的是( )
A. 将整个装置放在光下,毛细刻度管内的红色液滴向左移动
B. 将整个装置置于暗室中,一段时间后检查红色液滴是否移动,可以证明光是光合作用的必要条件
C. 当NaHCO3溶液浓度不变时,在乙内加入少量蠕虫,对红色液滴的移动不产生明显影响
D. 为使对照更具说服力,甲中也应放置等量相同的伊尔藻
查看答案和解析>>
科目:高中生物 来源: 题型:
【题目】生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定实验中,以下操作错误的是
A. 还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀
B. 使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现用现配
C. 用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热
D. 只有脂肪的鉴定需要使用显微镜
查看答案和解析>>
科目:高中生物 来源: 题型:
【题目】如图表示人体内糖类、脂肪和蛋白质的部分代谢途径,图中A、B、C、D、E、F、G表示物质,①、②、③、④表示过程。
(1)脂肪消化后的产物,大部分先被吸收到小肠绒毛内的_____________________。
(2)物质E是_______,物质F是________,物质G是_______________。
(3)在过程①、②、③、④中,释放能量最多的是________________,需要消耗能量的是_____________,需要消耗氧气的是_______________。
(4)物质B从小肠肠腔中被小肠上皮细胞吸收到进入组织细胞,至少需要经过______层细胞膜。
(5)在消化道中,淀粉变为物质B,需经过唾液淀粉酶、胰淀粉酶、肠淀粉酶和____酶的催化分解。
(6)肌糖元的功能是____________。
(7)人体中氨基酸的主要来源途径有食物中蛋白质的消化分解、糖类等物质的转变和____。
查看答案和解析>>
科目:高中生物 来源: 题型:
【题目】甲图表示骨骼肌细胞的膜蛋白及其功能的关系;乙图表示四类细胞的亚显微结构模式图,①~⑥表示细胞的各结构。请据图分析回答下列问题:
(1)甲图提现了细胞膜的_______和______的功能,均体现了膜蛋白的_____性。
(2)从结构上看,乙图Ⅰ~Ⅳ中_______没有以核膜为界限的细胞核,有且只有一种细胞器。
(3)因为Ⅳ既含有③又含有_________,所以确定Ⅳ是__________细胞。
(4)Ⅱ细胞因为具有_________(填序号),所以能够通过渗透作用吸水和失水,当将Ⅱ细胞置于质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液中时,细胞将会发生_________和细胞壁分离现象。
(5)四类细胞中共有的细胞器是____________,四类细胞与周围环境进行信息交流均依赖于_______________。
(6)乙图Ⅰ细胞某些亲核蛋白可通过核孔进入细胞核中发挥作用。下列物质中,洋葱根尖分生区细胞和造血干细胞都需要运进细胞核的是_______(多选)。
A.RNA聚合酶 B.DNA聚合酶 C.丙酮酸分解酶 D.ATP水解酶 E.淀粉酶
查看答案和解析>>
科目:高中生物 来源: 题型:
【题目】下列物质通过细胞膜时,需要载体蛋白的是( )
A.水分从组织液进入组织细胞
B.神经细胞吸收K+
C.肺泡中的氧气进入肺泡壁细胞
D.人体胃部细胞吸收酒精
查看答案和解析>>
科目:高中生物 来源: 题型:
【题目】某生态系统中有a、b、c、d四种生物,构成食物链a→b→c,d为分解者。下图是该生态系统中能量流 入b处发生的一系列变化的示意图,下列说法错误的是
A. 图中b的粪便中流向分解者的能量不属 于b
B. 参与丁过程的主要是真菌和细菌
C. 当生态系统处于相对稳定状态时,b的种群数量一般处于K/2值
D. 图中d的能量不全部来自b生物
查看答案和解析>>
湖北省互联网违法和不良信息举报平台 | 网上有害信息举报专区 | 电信诈骗举报专区 | 涉历史虚无主义有害信息举报专区 | 涉企侵权举报专区
违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com